研究目的
开发一种基于量子点的荧光寿命成像显微镜(FLIM)葡萄糖纳米传感器,用于细胞内葡萄糖检测,利用量子点(QDs)的独特光学特性和硼酸与葡萄糖的结合能力。
研究成果
本研究开发的QD-APBA缀合物可作为有效的葡萄糖纳米传感器,FLIM方法在细胞内葡萄糖检测的灵敏度和选择性方面具有显著优势。量子点的长荧光寿命使其能够与细胞自身荧光清晰区分,从而提高信噪比。该方法通过监测细胞内葡萄糖水平,在癌症诊断应用中具有潜力。
研究不足
该研究受硼酸-葡萄糖相互作用对pH值的依赖性限制,在碱性条件下才能达到最佳灵敏度。此外,其对葡萄糖相对于果糖等其他单糖的选择性并非绝对,不过干扰糖类的生理浓度低于检测限。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用氨基苯硼酸(APBA)修饰的CdSe/ZnS量子点制备QD-APBA偶联物用于葡萄糖检测。通过时间分辨光谱和荧光寿命成像显微技术(FLIM)克服了基于光致发光强度测量的局限性。
2:样本选择与数据来源:
使用MDA-MB-231细胞测试葡萄糖胞内检测效果。合成了QD-APBA偶联物并表征其对葡萄糖的响应特性。
3:实验仪器与材料清单:
仪器包括JASCO FP-6500荧光分光光度计、FluoTime 200荧光仪、MicroTime 200荧光寿命显微系统及LIBRA 120 PLUS透射电镜。材料包含CdSe/ZnS量子点、APBA、EDC、NHS及各类缓冲液。
4:实验流程与操作步骤:
通过EDC/NHS偶联反应合成QD-APBA偶联物。采用FLIM技术在溶液和MDA-MB-231细胞中测试葡萄糖响应,通过细胞活性检测评估细胞毒性。
5:数据分析方法:
使用FluoFit 4.4和SymphoTime 32软件分析光致发光衰减曲线,通过计算平均荧光寿命量化葡萄糖浓度。
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FluoTime 200 fluorometer
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Used for recording PL decay traces of QDs in the single-photon timing (SPT) mode.
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Used for recording PL lifetime images and reconstructing PL decay traces from the QD nanoparticles.
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CdSe/ZnS QDs
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