研究目的
评估趋化因子信号传导和单核细胞募集的扰动是否能成为新生血管性年龄相关性黄斑变性(nvAMD)的新型辅助治疗靶点。
研究成果
BKT130玻璃体内给药可抑制单核细胞募集,缩小脉络膜新生血管(CNV)面积,并降低LI-CNV模型中促血管生成和促炎细胞因子的表达。该研究表明,通过干扰趋化因子信号通路靶向调控单核细胞募集,或可作为新生血管性年龄相关性黄斑变性(nvAMD)抗VEGF疗法的补充治疗手段。
研究不足
大鼠中的LI-CNV模型是一种伤口愈合反应,不能完全模拟人类新生血管性年龄相关性黄斑变性(nvAMD)的复杂性。啮齿类动物缺乏明确的黄斑限制了该模型与人类病理的相关性。此外,由于aflibercept单药治疗在LI-CNV模型中存在天花板效应,该研究未能证明BKT130与aflibercept联合治疗的功能性效果。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用大鼠激光诱导脉络膜新生血管(LI-CNV)模型及离体脉络膜芽生试验(CSA),评估BKT130、阿柏西普及其联合用药对CNV生长和单核细胞募集的影响。
2:阿柏西普及其联合用药对CNV生长和单核细胞募集的影响。 样本选择与数据来源:
2. 样本选择与数据来源:LI-CNV模型使用8-12周龄成年Long-Evans大鼠,CSA实验采集新生血管性年龄相关性黄斑变性(nvAMD)患者血样。
3:实验设备与材料清单:
设备包括用于玻璃体内注射的PLI-100皮升级注射器、成像用荧光显微镜(Olympus BX41)及免疫荧光分析用蔡司LSM 710共聚焦激光扫描系统;材料包括BKT130、阿柏西普及多种免疫组化抗体。
4:阿柏西普及多种免疫组化抗体。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:于激光损伤时及5天后进行玻璃体内注射,激光损伤后10天解剖视网膜色素上皮-脉络膜铺片并进行凝集素染色,通过免疫组化和QPCR评估单核吞噬细胞募集及基因表达水平。
5:数据分析方法:
采用ImageJ软件量化CNV面积及CD11b+细胞计数,QPCR数据通过2(-ΔΔCT)法分析。
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Fluorescent microscope used for imaging isolectin-stained RPE-choroid flat mounts.
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Used for intravitreal injections in the experimental procedure.
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Biokine Therapeutics Ltd.
Promiscuous chemokine antagonist tested for its effects on CNV growth and monocyte recruitment.
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Bayer Pharma AG
Anti-VEGF therapy used as a positive control in the study.
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