研究目的
我们研究的目的是利用数字染色的离体共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)图像详细评估人体皮肤结构的外观,并将结果与同一标本的传统苏木精-伊红(H&E)切片进行比较。
研究成果
离体共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)图像的数字染色是一种简便且极具价值的工具,能帮助熟悉H&E染色的皮肤病理学家和莫氏手术医师更易解读共聚焦显微镜生成的暗场图像。与色素结构不同,皮肤及皮下结构仅需极小差异就能实现与H&E切片高度相似的清晰可视化。
研究不足
由于黑色素的折射率高,发干呈现亮粉色,而黑素细胞和噬黑素细胞成像效果不佳,导致整体呈现强烈的粉红色外观,与传统H&E染色组织病理学图像差异显著。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用离体共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)结合自动化数字染色技术,模拟常规苏木精-伊红(H&E)组织病理学检查。
2:样本选择与数据来源:
26名患者在皮肤肿瘤R0切除后的整形重建手术中捐献了Burow三角区(健康皮肤)。
3:实验设备与材料清单:
VivaScope 2500M-4G显微镜(MAVIG GmbH)、吖啶橙溶液、磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)、福尔马林、石蜡。
4:4)、福尔马林、石蜡。
实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:将皮肤样本置于吖啶橙溶液中孵育,PBS冲洗后在离体CLSM垂直模式下扫描,随后经福尔马林固定、石蜡包埋并进行H&E染色。
5:数据分析方法:
由两名独立受训的皮肤病理学家对比数字染色共聚焦激光扫描图像与传统组织学检查结果。
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