研究目的
开发一种无需化学预处理即可直接分析小鼠骨骼并进行二维质谱成像的方法，以保留其生理和化学特性。
研究成果
所开发的方法允许使用IR-MALDESI对新鲜、未脱钙的小鼠骨骼进行直接分析和质谱成像（MSI），避免了会改变骨骼的过度样本制备步骤。该方法能够检测更广泛的内源性生物分子，并证明了IR-MALDESI用于骨骼二维质谱成像的可行性。
研究不足
该方法受限于需要精确的样本制备以确保均匀采样，以及在不进行化学改性的情况下分析骨骼的挑战。研究还指出，由于未改性的小鼠骨骼容易卷曲或碎裂，对其进行切片存在困难。
1：实验设计与方法选择
本研究采用红外基质辅助激光解吸电喷雾电离质谱成像技术（IR-MALDESI MSI）直接分析小鼠骨骼。方法包括将骨骼快速冷冻、嵌入熟石膏中，并使用IR-MALDESI联用Q Exactive Plus质谱仪进行成像。
2：样本选择与数据来源
使用健康和卒中影响的C57Bl/6J小鼠骨骼。骨骼经快速冷冻并嵌入熟石膏后进行分析。
3：实验设备与材料清单
Q Exactive Plus质谱仪（赛默飞世尔科技）,IR-MALDESI离子源,熟石膏（DAP Products Inc.）,Optima? LC/MS级水（Fisher Scientific）,甲酸（Sigma-Aldrich）,甲醇（Burdick and Jackson）
4：实验流程与操作步骤
将骨骼快速冷冻后嵌入熟石膏，置于IR-MALDESI成像平台上。平台冷却后平衡样本，随后通过中红外激光脉冲解吸骨骼每个体素中的中性分子，经电离后由质谱仪分析。
5：数据分析方法
数据在XCalibur中处理，通过MSConvertGUI转换为.mzML格式后再转为.imzML文件。使用METASPACE进行特征注释，MSiReader生成离子热图。
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获取完整内容-
Q Exactive Plus
Thermo Fisher Scientific
Mass spectrometer used for analyzing the mass-to-charge ratio of ions.
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IR-MALDESI source
Ionization source for mass spectrometry imaging.
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Plaster of Paris
DAP Products Inc.
Embedding material for bone samples.
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Optima? LC/MS grade water
Fisher Scientific
Solvent used in the embedding mixture.
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Formic acid
Sigma-Aldrich
Used as a solvent in mass spectrometry measurements.
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Methanol
Burdick and Jackson
Solvent used in mass spectrometry measurements.
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