研究目的
研究利用激光捕获显微切割技术（LCM）从异质性组织（特别是小鼠胚胎软骨和骨骼）中分离特定细胞类型或目标区域，以进行基因表达分析。
研究成果
该方案为软骨和骨组织的激光捕获显微切割（LCM）提供了一种优化方法，能保持RNA的高完整性，便于后续进行RNA测序分析。该方法已成功应用于不同发育阶段软骨和骨组织的LCM，用于基因表达分析。
研究不足
所使用的LCM系统无法直接切割矿化组织，因此需要解剖整个骨区域。经显微解剖的骨化区域并不均质，包含多个亚群。
1：新鲜冷冻标本制备：
解剖目标胚胎或组织，包埋于OCT复合物中并快速冷冻。
2：激光捕获显微切割冰冻切片：
将组织切片并收集于PEN膜载玻片上。
3：激光捕获显微切割样本制备：
用甲酚紫染色并脱水。
4：激光捕获显微切割：
分离软骨和骨区域。
5：显微切割组织裂解与RNA提?。?/p>
使用RNA提取试剂盒提取RNA。
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Leica LMD 6500
LMD 6500
Leica
Laser capture microdissection microscope for isolating specific cell types or regions of interest from heterogeneous tissues.
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RNA isolation kit
Used for DNase treatment and RNA extraction from microdissected tissues.
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PEN membrane slides
Used for collecting tissue sections during cryosectioning.
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cresyl violet
Stain used to visualize cartilage and bone in tissue sections.
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OCT compound
Used for embedding fresh frozen specimens.
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