研究目的
为学生提供使用MALDI-TOF MS四种方法鉴定蛋白质的实践经验,并强调蛋白质/肽测序在蛋白质组学研究中的重要性。
研究成果
该实验成功地向学生介绍了标准蛋白质组学技术和多种MALDI方法,为他们进行系统生物学中的高级实验和研究项目做好了准备。
研究不足
该实验需要使用MALDI-TOF质谱仪,但并非所有机构都配备此设备。由于仪器使用具有唯一性,必须为每位学生仔细安排单独的使用时段。
1:实验设计与方法选择:
学生对四种蛋白质进行四种MALDI分析(线性正离子模式、源内裂解、肽质量指纹图谱和源后衰变)。
2:样本选择与数据来源:
使用牛血清白蛋白、马肌红蛋白、牛钙调蛋白和牛细胞色素c作为样本。
3:实验设备与材料清单:
MALDI-TOF质谱仪、胰蛋白酶、二硫苏糖醇、碘乙酰胺及其他试剂。
4:实验步骤与操作流程:
学生对蛋白质进行还原、保护巯基、胰蛋白酶消化,并开展MALDI-TOF质谱分析。
5:数据分析方法:
学生使用软件工具分析质谱数据以鉴定蛋白质。
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获取完整内容-
MALDI-TOF MS instrument
Used for identifying proteins by mass spectrometry.
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Trypsin
Used for enzymatic digestion of proteins.
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Dithiothreitol
Used for reducing proteins.
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Iodoacetamide
Used for protecting exposed thiols.
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