研究目的
利用激光镊子拉曼光谱技术(LTRS)监测单细胞水平上的内部结构变化和化学修饰,研究放疗对鼻咽癌细胞(NPC)的治疗效果。
研究成果
结合多变量统计分析的LTRS技术能有效识别鼻咽癌细胞辐射后的生化变化,其中CNE2细胞较C666-1细胞表现出更高的辐射敏感性。该方法为分子水平评估放疗效果提供了新工具。
研究不足
该研究的局限性在于仅使用了两种鼻咽癌细胞系和单一辐射剂量。传统RS技术中细胞固定化学试剂的干扰也是一个限制因素。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用激光热拉曼光谱技术(LTRS)监测鼻咽癌细胞(NPC)经X射线照射后的变化。选取CNE2和C666-1两株鼻咽癌细胞系,给予临床剂量2.3 Gy照射,记录照射前后的拉曼光谱。
2:3 Gy照射,记录照射前后的拉曼光谱。 样本选择与数据来源:
2. 样本选择与数据来源:培养人鼻咽癌细胞系CNE2和C666-1,分为对照组和照射组,每组分析30个活细胞。
3:实验设备与材料清单:
使用自制LTRS系统,配备785 nm激光器、100倍油镜、光谱仪及CCD相机。
4:实验流程与操作步骤:
细胞经照射后消化重悬于PBS缓冲液进行LTRS分析,拉曼光谱采集时间40秒,激光功率约6 mW。
5:数据分析方法:
光谱数据预处理包括背景扣除、自发荧光消除、归一化处理,并采用SPSS软件进行多变量统计分析(PCA-LDA)。
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oil-immersion objective
100x
Olympus
Used to trap and collect Raman scattering signals of the cell
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laser
LE-LS-XXRaman
StarBright Laser AB
Used to trap single cell through beam expansion and shaping
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spectrograph
Holospec-f/2.2-NIR
Used to collect Raman scattering signals
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CCD camera
Princeton Instruments
Used to record Raman scattering signals
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