研究目的
开发一种以RAGE为靶点的多模态纳米粒子成像剂，用于准确评估体内（尤其是糖尿病相关疾病如外周动脉疾病[PAD]中）的RAGE水平。
研究成果
该研究成功证明了一种基于多模态纳米颗粒的成像剂在非侵入性检测小鼠后肢缺血模型中RAGE水平的实用性。靶向RAGE的探针在缺血组织中显示出显著摄取，为诊断和监测RAGE相关病理提供了潜在工具。
研究不足
64Cu-Rho-G4-CML的尺寸使其无法穿过血脑屏障，限制了其在神经学评估中的应用。此外，使用CML作为靶向配体可能在其他CML受体高度上调的情况下导致非特异性结合。
1：实验设计与方法选择：
开发一种多模态示踪剂（64Cu-Rho-G4-CML），使用第四代（G4）聚酰胺-胺（PAMAM）树状大分子，共轭罗丹明和铜-64（64Cu）螯合剂（NOTA），用于光学和PET成像。
2：样本选择与数据来源：
通过在不同葡萄糖浓度下培养的HUVEC细胞评估示踪剂的细胞结合能力，随后在小鼠后肢缺血模型中进行体内PET-CT成像。
3：实验设备与材料清单：
使用动态光散射（DLS）、电子显微镜、核磁共振（NMR）和伽马井计数器进行化学和结合评估。
4：实验流程与操作步骤：
合成多模态示踪剂，进行细胞结合研究、体内成像及RAGE水平的组织学评估。
5：数据分析方法：
分析结合特性、PET-CT成像数据及组织学染色以评估RAGE表达。
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gamma well counter
Wizard2
Perkin-Elmer
Used to measure radioactivity in samples.
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PAMAM dendrimer
G4
Used as a platform for the multimodal tracer, conjugated with rhodamine and copper-64 chelator for optical and PET imaging.
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p-SCN-Bn-NOTA
Bifunctional chelating agent conjugated to the dendrimer for copper-64 radiolabeling.
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tetramethylrhodamine succinimidyl ester
Fluorophore conjugated to the dendrimer for optical imaging.
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CML-modified human serum albumin
RAGE ligand used to target the dendrimer to RAGE-expressing tissues.
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dynamic light scattering
Used to evaluate the size distribution of the nanoparticle construct.
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electron microscopy
Used to visualize the nanoparticle construct.
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nuclear magnetic resonance
Used to characterize the chemical synthesis of the nanoparticle construct.
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microPET-SPECT-CT small animal scanner
Inveon
Siemens Healthcare
Used for in vivo PET-CT imaging.
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