研究目的
开发一种具有简便性、可靠性和高选择性的AA分析方法,用于分析应用和临床疾病诊断。
研究成果
基于二氢抗坏血酸(DHAA)的硝基还原反应(NRR)性能以及2,3-二氰基-5,6-二氟对苯醌(DFQ)和氧化邻苯二胺(OPDox)优异的光学特性,成功开发出一种高选择性检测抗坏血酸(AA)的双比率荧光-比色双信号读出方法。该荧光-比色双模式传感检测体系可输出多种信号,使分析结果更具说服力。该传感器还能用于实际血清样本中AA的检测,结果令人满意且具有良好的重复性。
研究不足
该方法可能受到高浓度Cl?的影响,因为Cl?能与Ag?生成不溶性盐,从而干扰目标物的检测。但可通过使用Hg2?与Cl?形成更难溶的沉淀盐来缓解这一问题。
1:实验设计与方法选择:
NRR策略包含三个过程:Ag+将OPD氧化为OPDox,AA抑制OPDox的生成并自身被氧化为DHAA。通过ESI-MS和1H NMR光谱分析证实了DHAA与OPD之间因二羰基团与二胺基团的缩合反应而产生的特异性NRR性能。
2:样本选择与数据来源:
实验所用的人血清样本经乙腈处理去除杂质。
3:实验设备与材料清单:
UV-2450分光光度计、F-7000荧光分光光度计、Bruker AVB-500光谱仪、ZQ2000质谱仪。
4:实验步骤与操作流程:
将不同浓度的AA、200 μM AgNO3和1.5 mM OPD在37℃下于Tris-HAc缓冲液(10 mM,pH=7)中混合孵育30分钟,随后在室温(25±1.0℃)下测定上述孵育溶液的荧光与比色光谱。
5:5 mM OPD在37℃下于Tris-HAc缓冲液(10 mM,pH=7)中混合孵育30分钟,随后在室温(25±0℃)下测定上述孵育溶液的荧光与比色光谱。 数据分析方法:
5. 数据分析方法:通过紫外-可见光谱和荧光光谱记录加入不同浓度AA后的紫外强度比与发射强度比变化。
独家科研数据包,助您复现前沿成果,加速创新突破
获取完整内容-
UV-2450 spectrophotometer
UV-2450
Shimazu Co.
Obtaining ultraviolet–visible (UV–vis) spectra
-
F-7000 fluorescence spectrophotometer
F-7000
Hitachi Co.
Fluorescence analysis
-
Bruker AVB-500 spectrometer
AVB-500
Bruker
Measuring nuclear magnetic resonance (1H NMR) spectra
-
ZQ2000 mass spectrometer
ZQ2000
Acquiring electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) spectra
-
登录查看剩余2件设备及参数对照表
查看全部