研究目的
研究导致错误折叠蛋白质在细胞环境中自组装成淀粉样聚集体的机制，重点关注扩散作用在多聚谷氨酰胺驱动的聚集体组装中的角色。
研究成果
研究表明，扩散是驱动聚集体成熟的主要机制，这与先前认为微管沿线的主动运输是唯一控制因素的观点相反。聚集体随时间推移逐渐成熟并更加紧密，其形成和发展是高度动态的过程。这些发现对于理解蛋白质聚集疾病和设计治疗策略具有重要意义。
研究不足
该研究聚焦于一种特定的多聚谷氨酰胺聚集模型，可能无法完全代表不同细胞环境或疾病模型中蛋白质聚集的所有方面。细胞环境的复杂性可能引入数学模型未考虑的变量。
1：实验设计与方法选择：
采用高速结构光照明显微镜（SIM）和单颗粒追踪技术（SPT）观察活细胞中含聚谷氨酰胺蛋白聚集体的动态变化。通过数学建模模拟聚集体形成与扩展过程。
2：样本选择与数据来源：
使用稳定四环素诱导型HEK细胞系，其表达亨廷顿蛋白第1外显子部分序列（含72个谷氨酰胺残基的扩展polyQ区域，HDQ72），该序列分别与SNAP-tag蛋白或增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合。
3：实验设备与材料清单：
定制化SIM系统（可实现90纳米空间分辨率，帧率达22Hz）、共聚焦显微镜（Leica TCS SP5）及多种抗体与染色试剂。
4：实验流程与操作步骤：
通过延时成像观察聚集体形成与扩展过程。进行HDAC6和微管蛋白免疫染色后，开展超分辨成像及三维重建。
5：数据分析方法：
采用SPT算法分析聚集体簇轨迹，对演化中的聚集体拓扑结构进行分形分析，运用数学建模模拟聚集体生长过程。
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