研究目的
为了阐明Müller胶质细胞在视网膜色素变性小鼠模型(RhoP23H/P23H)中吞噬视杆光感受器细胞的作用,并确定负责清除死亡光感受器细胞体的细胞。
研究成果
在RhoP23H/P23H小鼠视网膜退变的早期阶段,穆勒胶质细胞是清除死亡视杆光感受器细胞的主要吞噬细胞。巨噬细胞的贡献有限,主要集中在外核层的内侧部分。穆勒胶质细胞的吞噬功能对于维持视网膜稳态及在正常和病理条件下进行重组至关重要。
研究不足
该研究仅限于特定的视网膜色素变性小鼠模型(RhoP23H/P23H),其发现可能无法直接推广至其他模型或人类视网膜色素变性。死亡光感受器细胞体的快速清除给可视化和量化带来了挑战。
1:实验设计与方法选择:
采用视网膜色素变性小鼠模型(RhoP23H/P23H)研究死亡光感受器细胞体的吞噬清除过程。使用透射电子显微镜(EM)和荧光显微镜进行观察。
2:样本选择与数据来源:
分析出生后第14天(PND 14)的RhoP23H/P23H、RhoP23H/+和Rho+/+小鼠视网膜。
3:3H、RhoP23H/+和Rho+/+小鼠视网膜。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:包括透射电镜(1200 EX;JEOL)、共聚焦显微镜(TCS SP5 II、TCS SP2 MP、TCS SP8;徕卡显微系统)及多种标记用抗体。
4:实验流程与操作步骤:
制备视网膜切片和铺片并用特异性抗体标记。分析解离的Müller胶质细胞的吞噬活性。
5:数据分析方法:
通过共聚焦显微镜图像进行吞噬事件的定量分析并开展统计学处理。
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transmission EM
1200 EX
JEOL
Used for ultrastructural imaging of retinal sections.
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confocal microscope
TCS SP5 II
Leica Microsystems
Used for confocal imaging of flat-mount retinas and dissociated M ¨uller glial cells.
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confocal microscope
TCS SP2 MP
Leica Microsystems
Used for confocal imaging of dissociated M ¨uller glial cells.
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confocal microscope
TCS SP8
Leica Microsystems
Used for confocal imaging of dissociated M ¨uller glial cells.
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