研究目的
研究抗病毒药物更昔洛韦（GCV）对成年斑马鱼Müller胶质细胞去分化和增殖的影响及其潜在的细胞和分子机制。
研究成果
GCV可能通过p53-p21cip1依赖性通路不可逆地抑制MGPC增殖，并使Müller胶质细胞维持长期去分化状态。这表明GCV有潜力作为揭示斑马鱼视网膜再生分子机制的工具。
研究不足
该研究仅限于斑马鱼模型，其发现可能无法直接推广至哺乳动物系统。GCV抑制MGPC增殖并维持穆勒胶质细胞去分化状态的确切机制尚需进一步研究。
1：实验设计与方法选择：
构建了Tg(1016tuba1a:GFP)转基因品系以识别穆勒胶质细胞损伤诱导的去分化。通过针刺成年斑马鱼眼球背部造成机械性视网膜损伤。在损伤发生时或通过角膜向眼玻璃体内注射磷酸盐缓冲液或更昔洛韦。
2：样本选择与数据来源：
本研究使用成年斑马鱼。
3：实验设备与材料清单：
高效液相色谱系统、免疫荧光显微镜、qPCR、蛋白质印迹分析。
4：实验流程与操作步骤：
采用反相高效液相色谱法测定更昔洛韦在眼内的清除率。利用GFP和BrdU免疫荧光评估更昔洛韦对视网膜再生的影响。通过TUNEL染色评估细胞凋亡。通过玻璃体内注射凝集素IB4偶联物标记小胶质细胞。
5：数据分析方法：
采用定量PCR和蛋白质印迹分析测定视网膜中的基因表达。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
Confocal imaging system
Leica SP5
Leica
Imaging of retinal sections
-
Fluorescent microscope
Leica DM4000B
Leica
Examination and imaging of slides
-
HPLC system
Waters 2695
Waters
Determination of GCV clearance rate from the eye
-
Real-time PCR detection system
CFX96TMReal-Time System
Bio-Rad
Quantitative PCR analysis
-
登录查看剩余2件设备及参数对照表
查看全部
