研究目的
开发一种多重氧化石墨烯(GO)荧光纳米探针,用于活细胞中信使RNA(mRNAs)的定量和成像,实现对癌细胞与正常细胞内mRNA表达水平的特异性区分。
研究成果
基于GO的纳米探针为分析特定mRNA的空间和动态分布及表达提供了一种新方法,能够在活细胞中实现多重靶标mRNA的高生物稳定性、有效荧光淬灭同步相对定量与成像。
研究不足
基于GO的纳米探针仅在无信号放大的情况下使用荧光标记染料检测细胞内mRNA表达,因此不适用于体液中细胞外RNA生物标志物的分析和成像。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用基于氧化石墨烯(GO)的荧光纳米探针检测活细胞中的mRNA,利用其与目标mRNA结合时的荧光淬灭与恢复机制。
2:样本选择与数据来源:
使用人肝癌细胞系HepG2和人正常肝细胞系LO2。
3:实验设备与材料清单:
包括GO纳米材料、标记荧光染料的识别寡核苷酸,以及用于表征和分析的各种仪器。
4:实验流程与操作步骤:
涉及纳米探针制备、细胞内mRNA成像及细胞内mRNA相对定量。
5:数据分析方法:
测量荧光强度并归一化为肌动蛋白(Actin)mRNA水平以实现相对定量。
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