研究目的
工程化设计了一种单体光开关荧光蛋白（FP）——moxMaple3，用于氧化性细胞环境（尤其是真核生物分泌途径），以提高能够形成发色团的正确折叠FP的产量。
研究成果
moxMaple3的工程设计产生了一种光开关荧光蛋白，在氧化环境中具有改进的折叠性和功能性，使其适用于PALM超分辨率显微镜和光学标记应用。研究发现C110V突变显著提高了能够形成发色团的正确折叠荧光蛋白的比例。
研究不足
该研究聚焦于moxMaple3在特定细胞环境中的工程构建与特性分析，但未探究其发现对其他荧光蛋白或细胞环境的普适性。
1：实验设计与方法选择：
通过靶向突变对moxMaple3进行工程改造，以提高其在氧化环境中的折叠能力和功能。
2：样本选择与数据来源：
使用细菌和哺乳动物细胞表达荧光蛋白变体。
3：实验设备与材料清单：
包括日立U-2000分光光度计、FluoroMax-3荧光光谱仪、奥林巴斯IX81倒置荧光显微镜以及蔡司ELYRA TIRF-PALM-SIM显微镜系统。
4：实验流程与操作步骤：
涉及克隆、细菌表达、蛋白纯化、光谱表征及活细胞成像。
5：数据分析方法：
光谱数据分析、荧光强度测量以及PALM图像重建与分析。
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