研究目的
开发一种用于活细胞中H2S实时检测的非侵入式荧光纳米探针,利用金属增强荧光效应实现高灵敏度检测。
研究成果
所开发的Au@二氧化硅-四(4-羧基苯基)卟啉-铜离子纳米探针为活细胞内H2S检测提供了一种灵敏且选择性高的方法,其检测限低至17 nM。金纳米棒的金属增强荧光效应显著提升了荧光信号,能够实现对细胞中外源性和内源性H2S的实时监测。该方法为研究H2S在生物系统中的生理和病理作用提供了有前景的工具。
研究不足
该研究聚焦于体外及活细胞中H2S的检测,但未探索其在更复杂生物系统或体内模型中的应用。距离依赖的金属增强荧光效应需要精确控制二氧化硅壳层厚度,这可能限制纳米探针的可重复性和可扩展性。
1:实验设计与方法选择:
本研究基于染料功能化的金纳米棒@二氧化硅设计了用于H2S检测的荧光纳米探针,利用金属增强荧光效应。
2:样本选择与数据来源:
使用A549和H1299细胞进行细胞成像。
3:实验设备与材料清单:
采用透射电子显微镜(TEM)进行表征,紫外-可见光谱进行分析,共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)进行成像。
4:实验步骤与操作流程:
金@二氧化硅纳米颗粒的制备、四羧基苯基卟啉(TCPP)与金@二氧化硅的结合、金@二氧化硅-TCPP-Cu2+纳米探针的制备、体外H2S检测、细胞培养、MTT实验以及细胞中外源性和内源性H2S的检测。
5:数据分析方法:
通过荧光强度和寿命测量分析数据。
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获取完整内容-
Au nanorods
Used as the core of the nanoprobe for metal enhanced fluorescence effect.
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Silica
Used to coat the Au nanorods to prevent biological cytotoxicity and for surface chemical modification.
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TCPP
Used as the fluorophore molecule conjugated to the Au@silica for fluorescence detection.
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Cu2+
Used to quench the fluorescence of TCPP and as a switch for H2S detection.
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Na2S
Used as a source of H2S for the detection experiments.
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TEM
Used for characterization of the nanoparticles.
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UV-vis spectra
Used for analysis of the nanoparticles and fluorophores.
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CLSM
Used for imaging of the cells treated with the nanoprobe.
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