研究目的
为了解决间充质干细胞(MSCs)是在靶组织内直接发挥治疗作用,还是通过影响体内其他细胞类型(如巨噬细胞)间接发挥作用这一不确定性问题。
研究成果
在免疫功能正常的小鼠模型中运用活体多光子显微镜技术,为实时确定间充质干细胞的命运及相互作用提供了平台,有助于明确治疗效果是直接的还是通过其他细胞介导的,从而优化间充质干细胞的临床应用。
研究不足
该研究仅限于免疫功能正常的小鼠模型,可能无法完全适用于人类;使用特定转基因小鼠和荧光标记可能会引入人为假象;长期持久性及更广泛的组织效应尚未充分探讨。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用免疫功能正常小鼠模型的活体多光子显微镜技术,实时观察间充质干细胞(MSCs)与宿主细胞的动态相互作用。通过使用带有绿色荧光蛋白标记粒细胞(LysM+/GFP小鼠)的转基因模型来区分细胞类型。
2:样本选择与数据来源:
将人源间充质干细胞(hMSCs)用细胞追踪橙色染料(CTO)荧光标记后静脉注射至小鼠体内,以骨髓作为成像目标组织。
3:实验设备与材料清单:
高分辨率成像用多光子显微镜、荧光标记物(GFP和CTO)、免疫功能正常小鼠(LysM+/GFP模型)及hMSCs。
4:实验流程与操作步骤:
对MSCs进行标记并注射入小鼠体内;在骨髓中进行活体成像以追踪细胞随时间(分钟至小时)的相互作用,区分完整的MSCs与吞噬碎片。
5:数据分析方法:
通过通道组合与信号减除技术分析实时成像数据,追踪细胞路径并区分信号。
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