研究目的
评估姜黄素-乙二胺四乙酸（EDTA）介导的抗菌光动力疗法（aPDT）对完整牙本质龋微生态群落生物膜活力的抗菌效果。
研究成果
姜黄素与EDTA的联合使用增强了aPDT对牙本质龋微生态的抗菌效果，尤其在较低光照强度和较深生物膜层中更为显著，从而否定了"其对活力无影响"的零假设。
研究不足
该研究采用非荧光玻璃板替代牙本质以避免共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）检测中的干扰，但可能无法完全模拟自然牙体条件。LED光源功率较低导致照射时间过长，不具备临床可行性；高功率LED可解决此问题。生物膜模型可能无法反映体内生物膜的全部特征，且样本量较?。孔閚=4）。
1：实验设计与方法选择：
本研究旨在评估姜黄素-EDTA介导的光动力疗法（aPDT）对牙菌斑生物膜的影响。生物膜在微需氧条件下于玻璃载玻片上培养，经姜黄素与EDTA组合处理后接受LED光照，通过共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）测定其活性。因数据呈非正态分布，采用非参数检验进行统计分析。
2：样本选择与数据来源：
从3名7-11岁患有乳磨牙牙本质龋的儿童中采集牙本质龋样本（排除系统性疾病或近期使用抗生素者），用于生物膜培养。
3：实验设备与材料清单：
玻璃载玻片、McBain培养基、姜黄素、EDTA、LED光源（Biotable RGB）、光功率计、CLSM、染色试剂（荧光素二乙酸酯和溴化乙锭）及统计软件（SPSS）。
4：实验流程与操作步骤：
生物膜培养5天后，在避光条件下用姜黄素和/或EDTA处理2分钟，以特定能量LED光照，染色后通过CLSM根据活/死细胞比例测定活性。
5：数据分析方法：
采用SPSS 21.0版本的Kruskal-Wallis检验及事后Dunn检验（显著性水平P<0.05）。
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Confocal laser scanning microscope
TCS-SPE
Leica
Used to determine biofilm vitality
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Glass ionomer cement
Ketac Fil Plus
3M Espe
Used for restoring teeth after dentin collection
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Brain Heart Infusion broth
Used for storing dentin samples
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Glass slabs
Menzel
Used to grow biofilms to avoid fluorescence interference
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Sonicator
Single Ultra-Sonic Cell Disruptor
Merse
Used for sonicating dentin samples
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Mucin
Sigma Chemical Co.
Component of McBain medium
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Peptone
Becton, Dickinson & Co.
Component of McBain medium
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Casein peptone
Becton, Dickinson & Co.
Component of McBain medium
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Yeast extract
Becton, Dickinson & Co.
Component of McBain medium
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PIPES buffer
Sigma Chemical Co.
Component of McBain medium
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Curcumin
Sigma-Aldrich
Used as a photosensitizing agent
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EDTA
Sigma-Aldrich
Used as a chelating agent
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LED light source
Biotable RGB
Institute of Physics of S?o Carlos
Used for irradiation in aPDT
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Optical power meter
1916-C Optical Power Meter
Newport
Used to adjust irradiation time
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Fluorescein diacetate
Sigma Chemicals Co.
Staining reagent for live cells
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Ethidium bromide
Sigma Chemicals Co.
Staining reagent for dead cells
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Statistical software
SPSS version 21.0
IBM
Used for statistical analysis
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