研究目的
开发一种基于葡萄糖与3-氨丙基三乙氧基硅烷氧化还原反应原位生成硅纳米点的新型荧光检测方法,旨在实现高灵敏度、高特异性及在无需酶参与的生物样品中的应用。
研究成果
该方法通过原位合成硅纳米点成功实现了葡萄糖的荧光检测,具有高灵敏度(检测限为7 μM)、宽线性范围(10 μM至0.9 mM)、良好特异性(氨基酸干扰极?。┮约笆视糜谌搜宓雀丛由镅荆ɑ厥章柿钊寺猓┑奶氐?。这是一种新颖的无酶检测方法,在生物成像和传感领域具有进一步优化和应用的潜力。
研究不足
该方法与其他还原性糖类(如半乳糖和甘露糖)存在交叉反应,需要加热过程且检测时间较长(90分钟),因此可能不适用于快速床旁检测。
1:实验设计与方法选择:
该方法通过葡萄糖与氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)在温和条件(50°C反应90分钟)下的氧化还原反应实现硅纳米点(SNDs)的一步合成?;赟NDs形成时的荧光增强信号,采用荧光光谱法进行检测。
2:样本选择与数据来源:
使用不同浓度(0至900 μM)的葡萄糖溶液及加标人血清样本。样本制备通过混合APTES与葡萄糖后加热完成。
3:实验设备与材料清单:
透射电子显微镜(TEM)用于形貌分析,动态光散射(DLS)测定粒径分布,傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析化学键,X射线光电子能谱(XPS)进行表面表征,紫外-可见分光光度计(安捷伦Cary型号)检测吸收特性,荧光分光光度计(爱丁堡仪器FSL980测量子产率,F-7000荧光光谱仪测光稳定性),以及标准实验室加热/混匀设备。
4:实验流程与操作步骤:
将APTES与葡萄糖水溶液混合,在50°C加热90分钟生成SNDs。通过TEM、DLS、FT-IR、XPS、UV-Vis及荧光光谱对SNDs进行表征。在激发波长410 nm/发射波长475 nm条件下进行葡萄糖检测的荧光测量。使用氨基酸与其他糖类测试选择性。应用于加标葡萄糖的血清样本进行回收率实验。
5:数据分析方法:
通过荧光强度数据建立校准曲线(线性范围10-100 μM和150-900 μM)。检测限按信噪比3倍计算。对血清样本的回收率及相对标准偏差(RSD)进行统计分析。
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UV-Vis Spectrometer
Cary
Agilent
Used to collect UV-Vis absorption spectra of the raw materials and products, specifically for silicon nanodots.
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Fluorescence Spectrophotometer
FSL980
Edinburgh Instrument
Used to measure the quantum yield of silicon nanodots and perform fluorescence decay analysis.
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Transmission Electron Microscopy
Used to investigate the morphology and size of silicon nanodots (SNDs) by providing images of the nanoparticles.
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Dynamic Light Scattering
Used to measure the size distribution of silicon nanodots (SNDs) by analyzing light scattering.
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Fourier Transform Infrared Spectrometer
Used to confirm the presence of specific chemical bonds (e.g., Si-O-Si, Si-O-C) in the silicon nanodots through infrared spectroscopy.
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X-ray Photoelectron Spectrometer
Used for surface analysis of silicon nanodots to identify elemental composition and chemical states.
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Fluorescence Spectrometer
F-7000
Used for continuous irradiation to test the photostability of silicon nanodots and for recording fluorescence spectra.
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