研究目的
开发一种基于聚偶氮甲亚胺-聚氨酯与沸石复合材料的高度选择性和灵敏的荧光生物传感器,用于DNA分子的检测。
研究成果
该沸石基复合荧光生物传感器对DNA检测具有高选择性、高灵敏度和高可靠性,其最低检测限(LOD)为95.46 pmol/L,线性范围为2.5-25 nmol/L。在合成样品中表现出良好的回收率,且受常见物质干扰极小,适用于分析应用。
研究不足
该研究仅限于使用小牛胸腺DNA的体外条件;实际样本应用可能需要进一步验证。干扰研究未涵盖所有可能的干扰物,且线性范围较窄(2.5-25 nmol/L)。沸石的使用可能导致复合材料制备过程中的变异性。
1:实验设计与方法选择:
研究通过合成聚偶氮甲烷-聚氨酯(PAMU)并与沸石制备复合材料以增强官能团及与DNA的相互作用。采用荧光光谱法进行检测,因其具有高灵敏度和选择性。
2:样本选择与数据来源:
以小牛胸腺DNA(I型)为DNA来源。材料如(3-氨丙基)三甲氧基硅烷(APTMS)、2,4-二羟基苯甲醛(2,4-DHBA)、赖氨酸二异氰酸乙酯(LDI)和钠型沸石(Y型沸石)均为市售。
3:实验设备与材料清单:
设备包括Perkin Elmer FT-IR Spectrum One红外光谱仪、Bruker AC FT-NMR核磁共振仪、Shimadzu VP-10A凝胶渗透色谱仪、Perkin-Elmer LS 55荧光光谱仪、Zeiss EVO LS 10扫描电镜及超声波清洗器。材料包含DMF、EtOH、THF、MeCN和PBS缓冲液等化学试剂与溶剂。
4:实验流程与操作步骤:
通过缩合反应合成预聚物,逐步聚合制备PAMU,制备PAMU-沸石复合材料,采用FT-IR、NMR、GPC、SEM、荧光及紫外-可见光谱进行表征,优化参数(复合材料浓度、pH值、孵育时间),开展DNA检测实验、干扰研究及分析应用。
5:数据分析方法:
利用荧光强度差值(ΔF)校准DNA浓度,通过标准偏差和校准曲线斜率计算检测限(LOD)。统计分析包括合成样品的回收率与相对标准偏差(RSD)计算。
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FT-IR Spectrometer
Spectrum one
Perkin Elmer
Structural characterization of compounds using FT-IR spectroscopy
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NMR Spectrometer
AC FT-NMR
Bruker
Characterization of compounds using 1H-NMR and 13C-NMR spectroscopy
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Gel Permeation Chromatography
VP-10A
Shimadzu
Determination of molecular weight and PDI of polymers
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Fluorescence Spectrometer
LS 55
Perkin-Elmer
Fluorescence measurements for biosensor evaluation
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UV-Vis Spectrophotometer
UV-1800
Schimadzu
UV-Vis absorption measurements for DNA concentration and binding studies
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Scanning Electron Microscope
EVO LS 10
Zeiss
Investigation of surface morphology of materials
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Ultrasonic Bath Sonicator
Dissolution of zeolite in water for composite preparation
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Vacuum Oven
Drying of synthesized compounds and composites
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