研究目的
构建用于乳腺癌光热/光动力治疗的Ce6-AuNR@SiO2-d-CPP复合物,并验证其体内外疗效。
研究成果
Ce6-AuNR@SiO2-d-CPP通过联合光热疗法(PTT)和光动力疗法(PDT)有效治疗乳腺癌,通过多途径诱导细胞毒性和凋亡。该疗法为传统治疗提供了有前景的替代方案,在临床前模型中展现出显著疗效。
研究不足
该研究仅限于体外和动物模型(裸鼠),未涉及人体临床适用性。纳米结构的潜在毒性和长期效应尚未充分探究。d-CPP介导摄取的机制也未完全阐明。
1:实验设计与方法选择:
本研究设计了一种纳米结构体系,通过将介孔二氧化硅包覆的金纳米棒进行PEG化修饰、d-CPP功能改性并负载Ce6,实现光热治疗(PTT)与光动力治疗(PDT)的联合应用。研究方法包括材料合成、表征检测、细胞摄取实验、细胞毒性分析、凋亡机制探究及裸鼠荷瘤模型的体内药效验证。
2:样本选择与数据来源:
使用购自国家细胞资源库的人乳腺癌MCF-7细胞系,体内实验采用移植MCF-7异种移植瘤的雌性Nu/Nu裸小鼠。
3:实验仪器与材料清单:
主要设备包括紫外-可见-近红外分光光度计(紫外-1800PC,美谱达)、马尔文Zetasizer粒度仪、透射电镜(JEM1400PLUS,日本电子)、荧光显微镜(IX-81,奥林巴斯)、荧光分光光度计(Cary Eclipse,安捷伦)、多功能酶标仪(FlexStation 3,美谷分子仪器)、高内涵筛选系统(Operetta,珀金埃尔默)。主要试剂包括氯金酸、CTAB、硼氢化钠、硝酸银、抗坏血酸、正硅酸乙酯、3-氨丙基三乙氧基硅烷、马来酰亚胺-PEG2000-NHS、mPEG2000-NHS、d-CPP、RPMI-1640培养基、胎牛血清等(指定供应商提供)。
4:实验流程与操作方案:
通过种子生长法合成金纳米棒,依次进行二氧化硅包覆、PEG化修饰、d-CPP功能改性及Ce6负载。表征检测项目包括消光光谱、Zeta电位、粒径分布、包封率测定??挂种萍炼哉盏南赴闳∈笛?,在常光/暗场条件下分别进行PTT/PDT及联合治疗的细胞毒性测试,分析凋亡机制,并进行带激光照射的荷瘤小鼠体内治疗。
5:数据统计方法:
采用单因素方差分析(One-way ANOVA)结合Bonferroni校正进行多组比较,数据以均值±标准差(Mean±SD)表示。
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Fluorescence Microscope
IX-81
Olympus
Imaging live/dead staining and apoptosis in cells.
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Fluorescence Spectrophotometer
Cary Eclipse
Agilent
Recording fluorescence intensity for singlet oxygen measurement.
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High-content Screening System
Operetta
PerkinElmer
Recording fluorescence intensity for apoptotic enzyme activities.
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Transmission Electron Microscope
JEM1400PLUS
JEOL
Observing the form of nanoparticles and cellular uptake.
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UV-Vis-NIR Spectrophotometer
UV-1800PC
Mapada Instruments
Recording absorbance spectra of AuNRs in the wavelength range of 300–1000 nm.
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Zetasizer
Malvern Instruments
Measuring zeta potential and hydrodynamic diameter of nanoparticles.
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Multimode Reader
FlexStation 3
Molecular Devices
Measuring ROS levels and mitochondrial membrane potential.
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Laser
Changchun New Industries Optoelectronics Technology Co., Ltd.
Irradiation at 808 nm and 650 nm for PTT and PDT.
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