1：实验设计与方法选择：

采用定制立式激光扫描显微镜进行多光子成像。通过电光调制器（EOM）实现快速偏振分辨二次谐波成像（P-SHG），其与扫描同步的逐行偏振切换。校准过程确保偏振态精确性。

2：样本选择与数据来源：

使用八只野生型小鼠（129sv品系）离体皮肤真皮组织。样本经脱毛、表皮去除后切割为哑铃形以进行单轴拉伸加载。

3：实验设备与材料清单：

飞秒激光器（Mai-Tai，Spectra-Physics）、水浸物镜（20×，0.95数值孔径，Olympus）、光子计数光电倍增管（P25PC，Electron Tubes）、电光调制器（M350-210-02，Conoptics）、半波片（ACWP-700-1000-06-2，CVI）、四分之一波片（ACWP-700-1000-06-4，CVI）、快速电源（302A，Conoptics）、定制单轴牵引装置、浸没凝胶（Lacrygel，Europhta）。

4：95数值孔径，Olympus）、光子计数光电倍增管（P25PC，Electron Tubes）、电光调制器（M350-210-02，Conoptics）、半波片（ACWP-700-1000-06-2，CVI）、四分之一波片（ACWP-700-1000-06-4，CVI）、快速电源（302A，Conoptics）、定制单轴牵引装置、浸没凝胶（Lacrygel，Europhta）。 实验流程与操作规范：

4. 实验流程与操作规范：以缓慢应变率（2微米/秒）拉伸皮肤样本并同步测量受力。每个拉伸比例步进（0.05增量）下采用18个入射偏振角（0-170°每10°间隔）进行P-SHG成像。以100kHz像素速率采集图像堆栈（375×375×50微米3）。

5：05增量）下采用18个入射偏振角（0-170°每10°间隔）进行P-SHG成像。以100kHz像素速率采集图像堆栈（375×375×50微米3）。 数据分析方法：

5. 数据分析方法：基于P-SHG数据通过FFT算法逐像素确定胶原取向。计算取向分布熵值并与拉伸比例作图。采用线性拟合量化重排程度，同时应用形态学滤波进行对比分析。