研究目的
利用锥细胞功能障碍的遗传小鼠模型，研究锥细胞信号传导对小鼠眼球屈光发育及近视易感性的影响。
研究成果
在正常视觉条件下，视锥细胞功能缺失不影响小鼠的正常屈光发育，但会增强其对形觉剥夺性近视的易感性。这表明视锥通路对小鼠正视化过程并非关键因素，而视杆细胞和视锥细胞共同参与视觉信号传导以应对形觉剥夺。视网膜多巴胺水平既不受该突变影响，也不因形觉剥夺改变，提示近视易感性增加可能与多巴胺变化无关。
研究不足
在P28阶段使用Gnat2cplf3/cplf3小鼠可能并未完全丧失视锥细胞功能，因为残留的视锥细胞功能可能为实验室条件下正常屈光发育提供最低限度所需阈值，同时增加形觉剥夺的易感性。此外，光学相干断层扫描（OCT）对视网膜色素上皮（RPE）表面检测的有限分辨率可能影响眼轴长度测量。
1：实验设计与方法选择：
采用Gnat2 cplf3/cplf3（Gnat2-/-）小鼠作为视锥细胞功能障碍的遗传模型，研究正常及形觉剥夺（FD）条件下的屈光发育和近视易感性。方法包括通过视网膜电图确认视锥细胞功能障碍、光反射法测量屈光不正、角膜曲率计测量角膜曲率、光学相干断层扫描测量眼轴长度，以及高效液相色谱法分析多巴胺和DOPAC水平。
2：样本选择与数据来源：
小鼠来自本实验室繁殖群，Gnat2 cplf3/cplf3小鼠购自杰克逊实验室（库存编号：006795）。使用C57BL/6J背景的年龄匹配的雄性和雌性野生型（Gnat2+/+）和Gnat2-/-小鼠。样本量：正常视觉条件（Gnat2+/+：n=7，Gnat2-/-：n=9），FD条件（Gnat2+/+戴眼罩组n=5-7，未处理组n=5-6；Gnat2-/-戴眼罩组n=7-9，未处理组n=10-11）。
3：实验设备与材料清单：
自动化红外光反射仪、角膜曲率计、谱域光学相干断层扫描系统（SD-OCT；Bioptigen公司，美国北卡罗来纳州达勒姆）、高效液相色谱（HPLC）系统、头戴式漫射眼罩、视网膜电图设备。
4：实验流程与操作步骤：
小鼠饲养于12小时光照/12小时黑暗周期。正常发育组从4至14周每2周测量眼部参数一次。FD组在4周龄时单眼佩戴漫射眼罩，持续3周每周测量一次。最终测量后48小时、光照开始后4至6小时收获视网膜，冷冻后通过HPLC分析。
5：数据分析方法：
使用双因素重复测量方差分析及Holm-Sidak事后检验分析眼部参数，双因素方差分析分析多巴胺和DOPAC水平，使用SigmaStat 3.5软件。
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spectral-domain optical coherence tomography system
SD-OCT
Bioptigen Inc.
Used to measure axial length from the anterior cornea to the retinal pigment epithelium in mouse eyes.
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high-performance liquid chromatography
HPLC
Used to analyze retinal levels of dopamine and DOPAC.
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automated infrared photorefractor
Used to measure refractive error in mice.
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photokeratometer
Used to measure corneal radius of curvature.
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head-mounted diffuser goggles
Used for monocular form-deprivation in mice.
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electroretinography equipment
Used to record electroretinograms to confirm cone dysfunction.
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