研究目的
开发一种基于适配体的靶向选择性平台，利用荧光显微镜可靠检测磷酸盐缓冲盐水（PBS）中的大肠杆菌（E. coli），并提出基于Neubauer计数板法的细胞计数应用。
研究成果
基于适配体的金微方块平台对大肠杆菌检测具有高度选择性，荧光显微镜实验证实了这一点。该方法成功应用于纽鲍尔计数板进行精确细胞计数，显示出在小样本量下多重检测不同细胞类型的潜力。该方案为细菌检测提供了一种可靠且具有选择性的生物传感工具。
研究不足
该研究仅限于PBS溶液中的检测，在未经进一步优化的情况下可能无法直接应用于食品或水等复杂的实际样品。荧光显微镜的使用可能存在灵敏度限制，且该平台在大规模应用中的可扩展性和成本问题尚未涉及。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用固态平台，通过金微方阵阵列固定适配体，并利用荧光显微镜检测细菌细胞。设计流程包括适配体固定、与目标细胞结合以及选择性和细胞计数的验证。
2：样本选择与数据来源：
使用培养的大肠杆菌（ATCC通用菌株25922）和假单胞菌细胞。适配体购自Bioneer公司。
3：实验设备与材料清单：
包括荧光显微镜（OLYMPUS BX43）、分光光度计（Spectrophotometer 259, Sherwood）、离心机、用于金层沉积的直流溅射设备，以及二硫苏糖醇（DTT）、乙酸钠、乙酸乙酯和磷酸盐缓冲液（PBS）等化学试剂。
4：3）、分光光度计（Spectrophotometer 259, Sherwood）、离心机、用于金层沉积的直流溅射设备，以及二硫苏糖醇（DTT）、乙酸钠、乙酸乙酯和磷酸盐缓冲液（PBS）等化学试剂。 实验步骤与操作流程：
4. 实验步骤与操作流程：将适配体溶解于水中，加入DTT孵育后用乙酸乙酯提取。细菌经培养、离心后重悬于PBS中。金微阵列平台通过化学气相沉积和蚀刻法制备。将适配体固定在阵列上，孵育、洗涤后暴露于细菌溶液。通过结合前后的荧光图像评估选择性和强度变化。使用镀金Neubauer计数板进行细胞计数验证。
5：数据分析方法：
通过显微镜图像的荧光强度变化目视比较确认结合与选择性。使用分光光度法（OD600测量）测定细胞浓度。
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获取完整内容-
Fluorescence Microscope
BX43
OLYMPUS
Used to observe and capture fluorescence images of the Au-micro-array and bacteria binding events.
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Spectrophotometer
259
Sherwood
Used to measure optical density (OD600) for determining bacterial cell concentrations.
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Aptamer
Bioneer Corporation
Used as the recognition element for selective binding to E. coli cells.
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Neubauer Lam
Used as a platform for cell counting, modified with a gold layer for aptamer immobilization.
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DC Sputtering Equipment
Used to deposit a transparent gold layer on the Neubauer Lam.
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