研究目的
制备快速响应、光可切换的双色荧光环糊精纳米凝胶用于癌细胞成像。
研究成果
这些纳米凝胶具有快速光响应性、高能量转移效率、优异的可逆性、长期稳定性和细胞相容性，适用于癌细胞中的光开关双色荧光成像，在细胞标记和追踪方面具有潜在应用价值。
研究不足
螺吡喃在纳米凝胶中的光异构化速度比在DMF中慢，且当pH低于5时，由于转化为MCH+状态，FRET效率显著降低，这限制了其在高酸性环境中的应用。该研究是在体外进行的，可能无法完全代表体内条件。
1：实验设计与方法选择：
通过纳米沉淀法在水溶液中制备纳米凝胶，使用螺吡喃修饰的β-环糊精（β-CD-SP）、4-氨基-7-硝基-1,2,3-苯并氧杂恶二唑（NBDNH2）和1,6-己二异氰酸酯（HMDI）作为交联剂。该设计利用NBDNH2（供体）与螺吡喃（受体）之间的荧光共振能量转移（FRET），实现紫外/可见光照射下的可逆双色荧光。
2：样本选择与数据来源：
人角质形成细胞（HaCaT）和人舌鳞癌细胞（Cal27细胞）购自ATCC，在含FBS和抗生素的DMEM培养基中培养。纳米凝胶采用不同NBDNH2与β-CD-SP投料比制备。
3：实验设备与材料清单：
材料包括NBD-Cl、β-CD、DCC、DMAP、哌啶、SDS、溶剂（DCM、DMF等）、HMDI、2,3,3-三甲基吲哚啉、5-硝基水杨醛、细胞培养试剂（DMEM、FBS、青霉素-链霉素）、CCK-8试剂盒和多聚甲醛。设备包括核磁共振波谱仪、傅里叶变换红外光谱仪、动态光散射仪、透射电镜、紫外-可见分光光度计、荧光分光光度计和共聚焦显微镜。
4：实验步骤与操作流程：
合成NBDNH2、SPCOOH和β-CD-SP；先在DMF中反应后通过SDS水溶液纳米沉淀制备纳米凝胶；采用NMR、FTIR、DLS、TEM、紫外-可见光谱和荧光光谱进行表征；在紫外/可见光照射下对Cal27细胞进行成像；对HaCat细胞进行细胞毒性测定。
5：SPCOOH和β-CD-SP；先在DMF中反应后通过SDS水溶液纳米沉淀制备纳米凝胶；采用NMR、FTIR、DLS、TEM、紫外-可见光谱和荧光光谱进行表征；在紫外/可见光照射下对Cal27细胞进行成像；对HaCat细胞进行细胞毒性测定。 数据分析方法：
5. 数据分析方法：能量转移效率（E）计算公式为E = [1 - F/F0]，其中F0和F分别为可见光或紫外光下的荧光强度。对粒径测量值和荧光强度进行统计分析。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
NMR spectrometer
Avance 400 MHz
Bruker
Characterization of chemical structures
-
FTIR spectrometer
Nicolet iS10
Thermo Scientific
Recording FTIR spectra
-
DLS instrument
Nano-ZS ZEN3600
Malvern
Measuring hydrodynamic size
-
TEM
JEM-2100
JEOL
Observing size and morphology
-
UV-Vis spectrophotometer
UV3600-230 VCE
Shimadzu
Recording UV-Vis spectra
-
Spectrofluorophotometer
RF-5301PC
Shimadzu
Obtaining emission spectra
-
Confocal microscope
FV1000
Olympus
Cell imaging
-
登录查看剩余5件设备及参数对照表
查看全部
