研究目的
开发和验证一种高亮度近红外BODIPY染料（BD），用于增强C57Bl/6小鼠急性肝损伤炎症反应的体内光学成像，克服现有染料在深部器官成像中的局限性。
研究成果
BD染料在亮度、信噪比和低细胞毒性方面显著优于CD染料，能够增强对免疫功能正常小鼠肝脏等深部器官中炎症细胞募集的体内成像效果。其分子结构和膜定位特性赋予了更优异的光学性能，有助于实现精准的细胞追踪，为生物医学研究和治疗评估开辟了新途径。
研究不足
该研究仅限于C57BL/6小鼠的急性肝损伤模型；对慢性疾病或其他器官系统的适用性尚需进一步验证。该染料与其他荧光团进行多重成像的性能正在研究中，但尚未完全确立。野生型小鼠的组织深度和色素沉着仍是挑战，不过BD能改善信号检测。
1：实验设计与方法选择：
本研究通过IVIS和FACS比较了新型BD染料与金标准CellVue Burgundy 710（CD）染料在活体细胞示踪中的性能。理论模型采用TD-DFT计算解析BD的分子轨道与光物理特性。
2：样本选择与数据来源：
以C57BL/6小鼠为模式生物，分离中性粒细胞后分别用BD或CD染料标记。通过腹腔注射四氯化碳（CCl4）诱导肝损伤。
3：实验设备与材料清单：
设备包括岛津UV-1800分光光度计、岛津RF-6000荧光分光光度计、PTI EasyLife荧光寿命测定仪、珀金埃尔默IVIS Spectrum活体成像系统、BD LSRFortessa? X-20流式细胞仪、蔡司AxioImager正置显微镜。材料包含BD染料、CD染料（CellVue Burgundy 710）、溶剂（环己烷、油酸、DMSO、Triton X-100）及细胞标记固定试剂。
4：0）、溶剂（环己烷、油酸、DMSO、Triton X-100）及细胞标记固定试剂。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：小鼠经CCl4损伤后尾静脉注射1000万标记中性粒细胞，2小时后异氟烷麻醉下使用特定激发（675nm）/发射（720nm）滤光片进行IVIS活体成像。随后处死小鼠获取肝脏进行离体成像。流式细胞术评估细胞毒性与荧光强度，共聚焦显微镜观察固定中性粒细胞。
5：数据分析方法：
IVIS数据通过Living Image 4.4软件绘制感兴趣区域（ROI）分析，流式数据使用FlowJo V10软件处理，光谱解卷积采用PeakFit软件，统计学显著性检验使用非配对t检验。
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