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辐照剂量对巨噬细胞动力学、氧化应激及创面愈合的实时活体成像影响
摘要： 目的：本研究旨在通过实时活体成像技术，量化氦氖激光不同照射剂量对巨噬细胞动力学、组织氧化应激及创面愈合的影响。背景：已有研究表明光生物调节可减轻组织炎症并加速创面愈合，但优化巨噬细胞行为的激光参数尚未明确。我们假设定量实时活体成像能确定促进巨噬细胞迁移、降低活性氧及加速创面愈合的最佳能量密度。方法：采用Tg(mpeg-dendra2)转基因斑马鱼幼体，负载二氢乙啶检测氧化应激。建立尾鳍损伤模型后，分别以635nm连续波5mW氦氖激光给予3、9或18J/cm2能量密度照射，伤后120分钟内进行延时成像。比较伤后1小时与24小时图像的创面愈合百分比。结果：3J/cm2能量密度显著提升巨噬细胞迁移速度，减少迁移中途停顿次数，并表现出最强的定向迁移趋势。与对照损伤鳍相比，该能量密度组创面活性氧含量显著降低。3J/cm2和9J/cm2能量密度组的创面愈合速度均显著快于未照射对照组。结论：通过调节照射能量密度可操控创面巨噬细胞活性，从而降低创面活性氧水平并加速愈合。斑马鱼模型为实时定量比较不同激光参数下的巨噬细胞行为提供了有效手段。
关键词： 斑马鱼、巨噬细胞、氦氖激光、氧化应激、延时成像
更新于2025-09-22 21:38:33
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用于单细胞成像斑马鱼体节钟的分散前体节中胚层细胞培养的建立
摘要： 在脊椎动物中，体节分化是一个周期性的序贯形态发生过程。沿身体轴线周期性形成的称为体节的组织块，证明了遗传振荡器对发育中胚胎的调控模式。在斑马鱼中，驱动体节分化的细胞内时钟由Her/Hes转录因子家族成员组成，这些成员组织成负反馈环路。我们最近为周期性基因her1生成了转基因荧光报告品系，该品系重现了前体节中胚层（PSM）中振荡的时空模式。利用这些品系，我们开发了一种体外培养系统，可在单个分离的PSM细胞内实时分析体节分化时钟振荡。通过从转基因胚胎中取出PSM组织，然后将振荡区域的细胞分散到玻璃底培养皿上，我们建立了适合对单个时钟细胞的荧光信号进行延时成像的培养体系。该方法为直接操控体节分化时钟提供了实验和概念框架，具有前所未有的单细胞分辨率，从而能够区分并解析其细胞自主性和组织水平特性。
关键词： 发育生物学，体节发生，生物钟，原代细胞培养，原代培养，斑马鱼，振荡器，荧光，体外，延时成像
更新于2025-09-10 09:29:36