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一种无需转录和扩增的微阵列特异性mRNA检测双杂交方法
摘要： 开发了一种双杂交方法用于无酶检测管家基因的特定mRNA。通过将目标mRNA与微阵列上点样的互补DNA捕获探针杂交实现固定化。第二步杂交采用Cy5标记的标签DNA与mRNA另一区域结合，从而实现对目标的特异性标记。该方法通过省略转录和扩增步骤避免了酶促假象。本文描述了在总RNA中无转录无扩增分析RPLP0 mRNA所用捕获探针分子的开发过程。研究发现随着捕获探针目标特异性片段长度的增加，特异性信号增强。包含斑点自发荧光和非特异性标签结合的非特异性信号与捕获探针长度无关。仅在约30个核苷酸长度的短捕获探针上，在捕获探针特异性部分与基底附着位点之间增加额外间隔物才显著提升信号强度。
关键词： 基因表达、无酶、荧光显微镜、mRNA检测、微阵列
更新于2025-11-21 11:24:58
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远程光生物调节预处理调控小鼠脑转录组并抵御MPTP损伤
摘要： 经颅光生物调节（PBM）通过将低强度红光至近红外光（600-1100纳米）作用于头部，在多种神经退行性疾病的动物模型中具有神经?；ぷ饔?。然而，人类头皮和颅骨对光能的吸收可能限制经颅PBM在临床中的应用。我们先前研究表明，将光照靶向外周组织（即"远程PBM"）也能在帕金森病MPTP小鼠模型中保护大脑，提示远程PBM可能是克服经颅PBM穿透问题的可行替代方案。本研究旨在确定诱导神经保护的远程PBM有效预处理方案，并阐明其增强脑组织韧性的分子机制。Balb/c小鼠接受670纳米光（每日4焦耳/平方厘米）照射背部及后肢2、5或10天，随后连续两天注射帕金森病神经毒素MPTP（50毫克/千克）。尽管未直接照射头部，但10天远程PBM预处理显著减轻了MPTP导致的中脑酪氨酸羟化酶阳性多巴胺能细胞损失，并缓解了尾状核-壳核复合体中FOS阳性神经元的增加。通过RNA微阵列分析和通路富集分析发现，远程PBM后中脑转录组呈现细胞信号传导与迁移（包括CXCR4+干细胞和脂肪细胞因子信号）、氧化应激反应通路的上调，以及血脑屏障调节的改变。这些发现确立了远程PBM预处理作为可行的神经?；じ稍な侄危⒔沂玖烁孟窒蟮那痹诨?。
关键词： MPTP、微阵列、帕金森病、小鼠模型、神经保护、光生物调节
更新于2025-09-23 15:23:52
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光漂白对微阵列分析的影响
摘要： DNA微阵列已成为基因调控高通量分析的强大技术。然而，基于荧光团的微阵列信号强度具有极宽的动态范围，远超单次扫描的动态范围，从而限制了微阵列技术的核心优势——并行化。多扫描技术的实施是克服这些限制的有前景方法。但这些技术又受到荧光团在扫描仪激光照射下易发生光漂白的限制。本文研究了固态DNA微阵列中菁蓝3和菁蓝5的光漂白特性，考察了初始荧光强度及激光扫描仪相关变量（如光电倍增管电压）对漂白和成像的影响。所得数据用于建立模型，能分别模拟每种荧光团因光漂白导致的预期信号强度衰减程度，从而消除多扫描过程中光漂白引起的系统偏差。单次扫描应用也从中受益，因其依赖预扫描来确定最佳扫描仪设置。这些发现标志着向微阵列实验与分析标准化迈进了一步，有助于提高不同实验室间微阵列实验结果的可比性。
关键词： 光漂白、微阵列、花青染料、生物分析学、荧光团、生物信息学、DNA
更新于2025-09-23 15:22:29
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一种低成本激光纳米三维聚合物打印机，用于快速表面图案化及肽和聚糖微阵列的化学合成
摘要： 本文介绍了一种低成本的激光打印装置，该装置可在表面定点图案化形成具有特定聚合物纳米层。这些纳米层斑点作为"固体溶剂"，可包埋不同化学物质、化学构建单元、材料或前体，并能层层堆叠。通过熔融这些斑点图案，聚合物包埋的分子得以释放并发生化学反应。这使得研究人员能够快速在表面图案化多种分子和材料，直接在表面混合以实现高通量化学合成，从而生成并筛选多样化的微阵列库。与昂贵的喷墨或接触式打印技术相比，该方法无需预先混合墨水，可实现原位组合混合。通过首次制备糖类等生物分子的微阵列来筛选抗体与凝集素的相互作用，展示了该图案化技术的易用性和多功能性。此外，还实现了肽在微阵列上的逐层固相合成：含氨基酸的纳米层以特定图案被反复激光转移，并与功能化受体表面发生反应。这个简易系统可实现可重复的阵列制备（最小点间距达100微米），为昂贵的点样机器人技术提供了灵活且廉价的替代方案。
关键词： 微阵列、开源、激光诱导正向转移、组合合成、固相合成
更新于2025-09-19 17:13:59
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基于生物打印微阵列干涉法的即时检测设备实现血浆中无标记细菌定量分析
摘要： 现有的临床细菌检测方法在速度、灵敏度以及关键的即时检测（PoC）适用性方面存在不足。因此，提升临床即时检测生物传感技术的灵敏度至关重要。为此，我们在此报道一种基于无透镜干涉显微镜（LIM）的便携式即时检测设备。该设备采用高性能纳米等离子体技术和定制生物打印微阵列，能够直接实现无标记细菌（大肠杆菌）定量检测。仅需单步样本处理，即可提供40分钟的样本到数据周转时间。我们的技术具有单细胞检测灵敏度，无论是在缓冲液还是稀释血浆中均可实现，其检测极限本质上受限于检测体积内的细胞数量。在医院环境中使用时，该设备能准确区分脓毒症患者（感染性SIRS）与对照组（健康个体和非感染性SIRS患者），且无假阳性/阴性结果。用户友好的现场细菌临床诊断由此成为现实。
关键词： 微阵列、无标记检测、血浆样本、纳米等离子体技术、败血症、细菌
更新于2025-09-09 09:28:46
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[2018年IEEE国际纳米尺度操纵、制造与测量会议(3M-NANO) - 中国杭州(2018.8.13-2018.8.17)] 2018年IEEE国际纳米尺度操纵、制造与测量会议(3M-NANO) - 基于亲疏水图案的金纳米棒阵列精确定位横向排列
摘要： 本研究采用一种结合可控溶剂蒸发与亲疏水图案化的简单策略，实现了金纳米棒（GNRs）在任意形状平面基底上的定向组装。利用软质聚二甲基硅氧烷（PDMS）模板作为图案转移印章，成功将结构转印至基底表面。通过调控模板的结构与尺寸，如预期般制备出大面积取向排列的横向对齐GNRs阵列。扫描电子显微镜（SEM）图像显示，金纳米棒按设计要求精确定位，且组装分布均匀。
关键词： 亲水-疏水图案、金纳米棒、自组装、溶剂蒸发、微阵列
更新于2025-09-04 15:30:14