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通过星形聚乳酸的直接激光交联定制胶原膜结构特性以实现坚固支架的构建
摘要： 基于重组胶原蛋白的生物材料应用通常受限于其较差的力学性能——这些性能理想情况下应接近被修复组织的水平。本研究提出通过光敏星形聚乳酸的激光诱导固化来构建强韧生物材料的方法。引入增强图案后，所构建的胶原蛋白结构杨氏模量提升超过一个数量级（从未处理的0.15±0.02 MPa增至增强后的51.2±5.6 MPa）。研究表明：仅在激光辐射功率密度较高时（此时光固化区域累积热机械应力效应显著），增强图案的几何构型才会影响支架力学性能。聚乳酸的光交联既未损害支架细胞相容性，又在胶原基质中形成荧光区域，为体内无创监测该类材料的生物降解动力学提供了可能。
关键词： 机械性能、胶原蛋白、增强材料、光聚合、生物相容性聚合物、核黄素
更新于2025-11-21 11:24:58
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l-抗坏血酸、3-O-乙基-l-抗坏血酸和Trolox对核黄素敏化单线态氧生成的抑制作用
摘要： 核黄素（RF）是一种水溶性维生素B2，在人体皮肤和眼睛中作为内源性单线态氧光敏剂。研究人员在磷酸盐缓冲液（pH 6.8）中，分别测定了无添加及添加L-抗坏血酸（AA，维生素C）、3-O-乙基-L-抗坏血酸（3-EtAA）和生育酚（TX，维生素E的水溶性类似物）时，由RF产生的单线态氧近红外磷光的时间曲线。这些物质能抑制RF光敏化产生的单线态氧。例如，当添加0.4 mmol dm?3的AA或TX时（空气饱和水中溶解氧浓度为0.27 mmol dm?3），单线态氧生成的量子产率降至三分之一。AA和TX对RF光敏化单线态氧生成的抑制效果优于3-EtAA。通过荧光和瞬态吸收测量，确定了AA、3-EtAA和TX淬灭RF激发单重态和三重态的双分子速率常数。这些测量结果表明，观察到的抑制作用是由于AA、3-EtAA和TX淬灭了RF的激发单重态和三重态。AA、3-EtAA和TX淬灭单线态氧的双分子速率常数分别为1.8 × 108、0.27 × 108和4.4 × 108 mol?1 dm3 s?1。
关键词： 特罗洛克斯、核黄素、单线态氧、3-O-乙基-L-抗坏血酸、L-抗坏血酸
更新于2025-09-23 15:23:52
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光照射核黄酮的ROS介导抗菌活性：一种针对院内感染的光动力机制
摘要： 院内感染是现代治疗手段面临的主要威胁。这类感染的主要致病源是多重耐药革兰氏阴性菌，其导致的高发病率与死亡率促使新型抗生素研发迫在眉睫?？咕舛α品ㄗ魑裎捶⑾帜鸵┚甑男滦瞬呗员甘芄刈?。由于该疗法疗效高度依赖光敏剂的合理选择与使用，开发具有临床活性的光敏剂成为当务之急。本研究以大肠杆菌为模型，证实了核黄素的光动力抗菌潜力：通过DCFH-DA检测胞内ROS生成，测定脂质过氧化、蛋白质羰基化及LDH活性；进一步评估酶类（SOD、CAT、GSH）与非酶类抗氧化系统；结合菌落形成实验、光学显微镜及扫描电镜确认细菌死亡。结果显示处理组细菌呈现显著ROS爆发、氧化应激标志物水平明显升高且LDH活性大幅降低，菌落形成单位显著减少，显微图像证实细菌死亡。研究表明光照激活的核黄素能破坏细菌细胞氧化还原平衡，引发严重膜损伤最终致死。本工作为核黄素光疗开辟了新维度——其可有效靶向医院器具表面生物膜，防治相关重症感染。
关键词： 活性氧、抗菌、核黄素、光动力疗法、医院感染
更新于2025-09-23 15:23:52
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光激活染色剂角膜交联术（PACK-CXL）治疗重度角膜炎
摘要： 目的：报告我们采用光活化染色剂角膜交联术（PACK-CXL）治疗角膜炎患者的经验。方法：本回顾性研究纳入2009至2017年间赫尔辛基大学医院收治的26例（27眼）感染性角膜炎患者，这些患者在抗生素/抗真菌药物治疗无效或出现严重角膜融解后接受了PACK-CXL治疗。其中20例患者同期进行了羊膜移植术（AMT）。术后随访期为1周至12个月。结果：16例感染与佩戴隐形眼镜相关。19例培养阳性的病例中，主要致病微生物为铜绿假单胞菌（9例）。平均上皮愈合时间为13天，15例（56%）在一周内完成上皮化。26眼视力得到提升，7例患者（26%）最终视力达到或超过0.5（20/40斯内伦标准）。结论：对于对抗生素治疗无反应的感染性角膜炎患者，PACK-CXL似乎是一种安全且具有潜力的治疗选择。
关键词： 角膜交联术、感染性角膜炎、核黄素、角膜、PACK-CXL
更新于2025-09-23 15:22:29
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无右旋糖酐等渗核黄素溶液角膜交联术的六个月疗效观察
摘要： 目的：分析使用无右旋糖酐等渗核黄素溶液进行角膜胶原交联术（CXL）后圆锥角膜患者的短期临床及地形图结局。方法：本回顾性病例系列研究纳入26例圆锥角膜患者共26只眼。在术后6个月随访时评估最佳矫正视力（BCVA）、屈光状态及地形图参数。结果：CXL术前及术后1、3、6个月的平均BCVA（斯内伦视力表行数）分别为0.51±0.2、0.48±0.2、0.57±0.2和0.64±0.2，其中术前与术后6个月数值差异具有统计学意义（p=0.006）。平均等效球镜度从术前-5.6±2.4屈光度（D）降至-5.0±2.1 D，平均模拟角膜曲率从48.5±2.5 D降至47.8±2.6 D（p值分别为0.145和0.001）。此外，最大角膜曲率在随访期间呈进行性显著下降（p=0.003）。中央角膜厚度与最薄角膜厚度（含上皮层）分别从术前的442.8±25.6 μm和430.5±23.9 μm降至末次随访时的420.7±31.8 μm和409.3±28.7 μm（p<0.001）。术中及术后均未观察到并发症。结论：采用无右旋糖酐等渗核黄素溶液的CXL治疗圆锥角膜安全有效，可在短期内持续改善视力、角膜曲率及角膜厚度，但需长期随访验证这些结果。
关键词： 右旋糖酐、核黄素/治疗用途、胶原蛋白、视力、紫外线、角膜、交联试剂
更新于2025-09-23 15:22:29
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使用高强度365纳米发光二极管诱导核黄素对色氨酸的I型光氧化反应
摘要： 采用高浓度色氨酸（Trp）和核黄素（RF），在氮气、20%及100%氧气环境下使用高强度365纳米发光二极管（LED）光源，研究了核黄素敏化色氨酸光氧化的机制。在氮气环境中，色氨酸二聚化是主要途径（尽管产率较低，DφTrp=5.9×10?3），这可能是由于RF●?与Trp(H)●?之间发生大量反向电子转移反应所致。氧气的存在降低了这种反向电子转移反应的程度以及色氨酸二聚化的程度。这种差异归因于O?●?（通过RF●?向O?的电子转移生成）的形成，其迅速与Trp●反应，导致母体氨基酸大量消耗并形成过氧化物及多种其他氧化产物（N-甲酰犬尿氨酸、醇类、二醇类等，通过LC-MS检测到）。因此，由这种高强度365纳米光源诱导的色氨酸光氧化I型机制的第一步似乎是氨基酸与3RF之间的电子转移反应，而氧气的存在通过O?●?的形成调节了后续反应及产物的生成。这些数据具有潜在的生物学意义，因为已有提议将LED系统和基于RF的治疗方法用于治疗病理性近视和角膜炎。
关键词： 1型/2型机制、二聚体、发光二极管、N-甲酰犬尿氨酸、三聚体、核黄素、光氧化、电子转移、光漂白、色氨酸、三重激发态
更新于2025-09-23 15:21:21
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基于光致核黄素-氨茶碱体系诱导的氨基功能化石墨烯量子点荧光猝灭测定氨茶碱
摘要： 本研究开发了一种基于荧光光谱法灵敏测定平喘药氨茶碱（AP）的新方法。通过两步法合成了氨基功能化石墨烯量子点（afGQDs），并采用透射电子显微镜、紫外-可见吸收光谱和红外光谱对其进行表征。afGQDs的荧光通过动态淬灭和内滤效应被核黄素（Rf）猝灭。在氧气存在下，光照Rf-AP体系产生羟基自由基（?OH）。后者通过光诱导电子转移过程从afGQDs获取电子，导致荧光进一步下降。研究发现荧光强度变化程度与AP浓度在0.10-10 μg mL?1范围内呈正比，检测限达40 ng mL?1。该方法成功用于药物样品中AP的测定，回收率在99%-106%范围内。
关键词： 核黄素、光照射相互作用、氨基功能化石墨烯量子点、羟基自由基、氨茶碱、荧光猝灭
更新于2025-09-23 15:21:01
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核黄素介导的生物正交光催化触发PtIV前药生物活性
摘要： 我们近期证实核黄酮（Rf）可作为非传统生物正交光催化剂激活Pt(IV)前药。本研究表明，光与Rf联用两种Pt(IV)前药是诱导胰腺癌细胞光介导死亡的可行策略。在高耐受光动力治疗的Capan-1细胞中，Rf介导的顺铂和卡铂前药cis,cis,trans-[Pt(NH3)2(Cl)2(O2CCH2CH2CO2H)2]（1）及cis,cis,trans-[Pt(NH3)2(CBDCA)(O2CCH2CH2CO2H)2]（2，CBDCA=环丁烷二羧酸盐）的活化，显著降低了细胞存活率（包括缺氧条件下）。如1号化合物的摄取与细胞存活实验所示，该光活化模式主要在细胞内发生。通过Rf-1催化剂-底物对进行的195Pt核磁共振、圆二色谱DNA结合研究、质谱分析及免疫荧光显微镜检测表明，细胞死亡与高效的光诱导顺铂形成相关。相应地，Western印迹分析显示通过Rf介导的光化学活化出现DNA损伤标志及细胞死亡通路激活。作为DNA损伤指标的H2AX磷酸化，在Rf-1体系中严格依赖光照被检出，而游离顺铂在黑暗条件下也会发生。荧光显微镜再次证实Rf-1可光化学诱导核内pH2AX焦点形成，从而证明前药体系能高效光诱导释放顺铂。
关键词： 核黄素、胰腺癌、DNA损伤、铂(IV)前药、光催化
更新于2025-09-10 09:29:36
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核黄素-UVA交联人角膜中多模态显微镜、组织形态与酶抗性的相关性
摘要： 目的：为探究多模态显微镜作为评估角膜胶原交联（CXL）疗效的无创工具的实用性，我们研究了核黄素（RF）轴向分布、二次谐波成像（SHG）与人类角膜在RF-紫外线A（UVA）催化CXL后的组织学/生化改变之间的关联。 方法：对去上皮的人类角膜巩膜组织进行共聚焦和多光子显微镜成像，以研究CXL后RF的组织扩散分布及基于SHG的粗糙度指数（Rq）。分别设置0.1% RF作用5分钟、10分钟和20分钟，随后进行UVA照射，以右旋糖酐药物载体处理的角膜作为对照。采用马松三色染色和胶原酶消化实验评估RF-UVA CXL后胶原纤维板的超微结构改变及生物酶解强度。 结果：基质层对RF的吸收在20分钟给药时显著高于5分钟和10分钟给药。与右旋糖酐对照组相比，所有RF给药时间点的RF-UVA CXL后SHG图像粗糙度指数均降低。值得注意的是，仅在10分钟和20分钟RF给药组观察到RF剂量轴向分布与Rq指数存在相关性（R2分别为0.13和0.28，均P<0.05），而5分钟组未显示此关联。马松三色染色显示交联角膜中胶原纤维的致密程度呈RF剂量依赖性。胶原酶消化实验表明更高RF剂量使交联角膜的生化强度显著增强。 结论：基质内RF分布特征与RF-UVA交联角膜的组织学及功能特性改变相关。核黄素定义的阈值进一步确定了SHG成像作为评估RF-UVA CXL疗效的无创成像方式的敏感性。
关键词： 胶原酶消化、胶原交联、二次谐波成像、马松三色染色、核黄素
更新于2025-09-04 15:30:14
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不同角膜离子导入方案促进核黄素经上皮渗透的比较
摘要： 目的：采用不同经上皮离子导入方案测量核黄素在角膜中的渗透情况。 方法：将新鲜摘除的兔眼分为9个治疗组（每组4只眼）。其中一组在角膜上皮刮除后，使用0.1%重量体积比核黄素处理30分钟且不进行离子导入作为对照。其余组保持角膜上皮完整，采用不同核黄素配方及变化的离子导入电流、浸泡和冲洗时间进行处理。核黄素处理后，眼样本立即在液氮中速冻。随后通过双光子荧光显微镜对35微米厚的角膜横截面进行成像，并利用图像处理软件量化不同角膜深度的基质核黄素浓度。 结果：在上皮保留的离子导入治疗组中，使用更高浓度的核黄素溶液、更大的离子导入剂量及更长的溶液接触时间可实现更强的基质核黄素渗透。采用含0.25%重量体积比核黄素与0.01%苯扎氯铵（BAC）的方案，经过两次电流施加及后续浸泡循环（1mA持续5分钟，浸泡5分钟；0.5mA持续5分钟，浸泡5分钟），其基质核黄素渗透效果与去上皮对照组相当。最佳不含BAC的方案产生的基质核黄素渗透量约为去上皮对照组的60%。含生理盐水的核黄素溶液仅产生极低的基质渗透。尽管用平衡盐溶液冲洗眼表，上皮内的核黄素负载量仍等于或高于邻近基质。 结论：改良的离子导入方案可显著提升实验性角膜胶原交联中的经上皮核黄素渗透效果。
关键词： 离子电渗疗法、核黄素、双光子荧光显微镜、角膜交联术、跨上皮
更新于2025-09-04 15:30:14