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使用台式流式分析仪和高速细胞分选仪进行染色体分析
摘要： DNA染料Hoechst（HO）与放线菌素A3（CA3）的组合已成为人类及动物染色体双变量分析的首选方案。该分析需配备特定波长且功率高于常规台式流式细胞仪的激光器。本研究利用流式细胞术核心实验室的多台设备，采用不同DNA染料组合，对具有正常核型的人类细胞系染色体峰分辨率进行了检测。通过改良多胺分离缓冲液制备人类细胞系染色体，并将不同流式细胞仪获得的DAPI或Hoechst与碘化丙啶（PI）组合的双变量核型，与Mo-Flo细胞分选仪（紫外光及457nm激光功率各设为300mW）生成的DAPI或Hoechst与放线菌素A3参考核型进行对比。研究显示多数设备均能实现良好的染色体分离效果。本研究表明：配备标准固态488nm和355nm激光器的台式流式细胞仪，采用DAPI或Hoechst与PI的DNA染料组合，同样可开展染色体分析与分选工作。
关键词： 流式核型、分析仪、分选仪、染色体、分辨率、激光功率、流式细胞仪、双变量分析
更新于2025-09-04 15:30:14
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将染色微球分配等效参考荧光团数量
摘要： 将描述一种为每个染色微球分配一个称为"参考荧光团当量数（ERF）"的数值的方法。ERF单位表示溶液中能产生与单个染色微球相同荧光信号的参考荧光团数量。第一步是对参考荧光团溶液进行系列稀释并测量其荧光强度，利用所得荧光强度与对应浓度数据校准荧光计响应，该标定过程通过建立强度-浓度的线性关系实现。第二步通过测量微球悬浮液的荧光强度，借助第一步获得的校准线确定与该悬浮液荧光强度相当的参考荧光团等效浓度。第三步采用流式细胞仪和光阻法仪器测量用于荧光测量的微球悬浮液总浓度，其中流式细胞仪还能测定用于校准流式细胞仪荧光量程的亚群微球浓度。第四步综合前三步采集的数据为单个微球分配ERF值，这些具有ERF值的微球集合将用于在流式细胞仪各检测通道建立线性荧光量程。讨论部分将重点分析赋值过程中各步骤的不确定度评估。
关键词： 荧光、浓度、校准、ERF（等效球体因子）、微球、流式细胞仪
更新于2025-09-04 15:30:14