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基于抗EpCAM的免疫捕获实时分析：从分子到细胞的MP-SPR技术应用
摘要： 基于上皮细胞黏附分子抗体（抗EpCAM）的界面已被证明在捕获循环肿瘤细胞（CTCs）方面具有高效性。为实现抗EpCAM与界面的结合，采用生物素和链霉亲和素对表面进行修饰。这些过程对后续细胞捕获效率至关重要。然而，目前缺乏关于生物素、链霉亲和素与生物素化抗EpCAM在界面上相互作用的定量研究。本工作利用表面等离子体共振技术测定了生物分子相互作用的热力学和动力学参数。结果显示：生物素化抗EpCAM与链霉亲和素的平衡结合亲和力为2.75×10^6 M^-1，链霉亲和素与生物素（以生物素-PEG400-硫醇形式体现）的平衡结合亲和力为8.82×10^6 M^-1。在热力学平衡状态下，每个链霉亲和素最多可结合2.30个生物素化抗EpCAM。该发现为优化抗EpCAM修饰及提高CTCs捕获效率提供了重要依据。
关键词： 表面等离子体共振、上皮细胞黏附分子抗体、细胞捕获、生物素-链霉亲和素相互作用、热力学、动力学
更新于2025-09-23 15:23:52
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一种通过功能化银纳米粒子二聚化研究蛋白质相互作用动力学的等离子体方法
摘要： 理解蛋白质相互作用的动力学在生物学中起着关键作用，对医疗保健、研究和工业应用中疾病监测与诊断分析方法的设计具有重要意义。本文介绍了一种新型等离子体方法，通过紫外-可见光谱研究银纳米粒子（Ag NPs）二聚体形成后的蛋白-配体结合动力学，该方法可作为抗原检测与定量的探针。为阐释和验证该方法，我们研究了生物素-链霉亲和素（Biot-StV）原型对的相互作用动力学。通过添加化学计量比的麦胶蛋白特异性生物素化抗体（IgG-Biot），制备了链霉亲和素功能化Ag NPs的受控聚集体（二聚体）。系统研究了二聚化动力学随Ag NPs尺寸变化及不同IgG-Biot浓度下的规律。动力学数据表明其符合复杂反应机制——仅当Ag NPs与位于特定STV位点的IgG-Biot结合时才能形成二聚体。这些结果有助于阐明功能化Ag NPs二聚化动力学中的复杂反应机制，此类探针可用于基于表面等离子体共振的生物检测，实现不同生物标志物或目标分析物的检测与定量。
关键词： 生物素-链霉亲和素相互作用、银纳米颗粒、二聚化、蛋白质相互作用动力学、等离子体方法、表面等离子体共振、紫外-可见光谱法
更新于2025-09-11 14:15:04