生长抑制因子4影响视网膜色素上皮细胞中缺氧诱导的迁移和血管生成调控

摘要： 生长抑制因子4（ING4）是一种潜在的肿瘤抑制因子，与细胞迁移和血管生成相关。然而，其对糖尿病视网膜病变（DR）的影响尚未阐明。本研究旨在评估正常大鼠和糖尿病大鼠中ING4的表达情况，并阐明其对缺氧诱导的人视网膜色素上皮（ARPE-19）细胞功能障碍的影响。通过腹腔注射链脲佐菌素建立1型糖尿病大鼠模型，分别在4、8或12周后处死大鼠。采用蛋白质印迹分析、逆转录定量实时聚合酶链反应（RT-qPCR）和免疫组织化学检测视网膜组织中ING4的表达。在转染ING4过表达慢病毒载体或小干扰RNA（siRNA）后，通过划痕实验和Transwell实验检测缺氧条件下ARPE-19细胞的迁移能力。通过评估人视网膜内皮细胞（HREC）毛细血管管腔形成来检测ARPE-19细胞条件培养基（CM）的促血管生成作用。此外，通过蛋白质印迹分析和RT-qPCR研究ING4、特异性蛋白1（Sp1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9和血管内皮生长因子A（VEGF-A）参与的信号通路。研究发现，糖尿病大鼠视网膜组织中ING4表达显著降低。沉默ING4加重了缺氧诱导的ARPE-19细胞迁移。缺氧条件下转染ING4 siRNA的ARPE-19细胞收集的CM促进了HREC的血管生成。这些效应被ING4过表达逆转。此外，在缺氧处理的ARPE-19细胞中，ING4以Sp1依赖的方式抑制MMP-2、MMP-9和VEGF-A的表达。总体而言，我们的研究结果为ING4对ARPE-19细胞缺氧诱导的迁移和血管生成调控的?；ぷ饔锰峁┝擞屑壑档幕萍??；指碔NG4可能是治疗DR的新策略。