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基于正交双适配体的等离子体免疫夹心法便捷构建及其在复杂样本与活体动物中蛋白质疾病标志物检测的应用
摘要: 适配体因其合成简单、易于修饰等突出优势,已被广泛用作抗体替代物来构建新型免疫夹心检测法?;谒逝涮宓募行募觳夥ㄏ啾却趁庖呒行募觳夥ê偷ナ逝涮寮行募觳夥ň哂卸嘀赜攀?。然而,现有文献报道的适配体结合正交性知识有限,制约了这类检测法的构建。本研究提出一种便捷构建正交双适配体等离子体免疫夹心检测法(odA-PISA)的新策略,用于复杂样本和活体动物中的蛋白质检测。首先通过亲和毛细管电泳(ACE)从文献报道的适配体中高效筛选出正交适配体对,随后利用所选适配体便捷制备目标蛋白捕获金薄膜探针和银纳米粒子拉曼标记纳米标签构建检测体系。双适配体确保了检测特异性,而目标捕获探针与拉曼纳米标签间的等离子体耦合效应产生显著增强的拉曼信号强度,实现高灵敏度检测。以碱性磷酸酶(ALP)为模型靶标验证原理可行性,构建的odA-PISA对ALP表现出高特异性(交叉反应性≤4.2%)和高灵敏度(检测限3.8 pM,信噪比=4)。该方法成功实现了人血清中ALP的定量检测及荷瘤小鼠体内ALP的探测,展现出重要应用潜力。该策略可广泛适用于其他蛋白质疾病标志物,为构建适用于实际应用(特别是疾病诊断)的高灵敏度双适配体夹心检测法开辟了新途径。
关键词: 适配体、结合正交性、拉曼光谱法、等离子体免疫夹心检测法、疾病标志物
更新于2025-09-23 15:19:57
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基于胶体量子点的荧光纳米传感器用于还原型谷胱甘肽的测定
摘要: 基于巯基乙酸修饰的CdSe/ZnS胶体量子点荧光纳米传感器被开发用于测定还原型谷胱甘肽——这种非蛋白化合物在抗氧化应激?;ぶ芯哂兄匾饔?。研究提出了可在宽浓度范围内检测还原型谷胱甘肽的样品制备方案,并测量了该体系荧光强度随不同浓度还原型谷胱甘肽孵育时间的变化关系。实验证实该纳米传感器能可靠灵敏地检测10至1000微摩尔浓度范围内的还原型谷胱甘肽,其检测结果可用于生理介质中还原型谷胱甘肽的定量分析,在医学诊断领域具有重要应用价值。
关键词: 量子点、纳米颗粒、光学纳米传感器、荧光、还原型谷胱甘肽、疾病标志物、医学诊断
更新于2025-09-11 14:15:04