基于双搅拌棒辅助双重信号放大的氯霉素无酶荧光检测法

摘要： 介绍了一种无酶荧光检测方法，通过双搅拌棒实现双重信号放大。设计了两条Y型DNA探针并固定在搅拌棒上。当加入目标物（以氯霉素为模型分析物）时，触发目标循环再生并同步催化发夹组装（CHA）。大部分DNA引物从搅拌棒释放至上清液，形成含G-四链体DNA序列的发夹结构。该G-四链体能特异性结合硫黄素T（ThT）并发射荧光（激发/发射峰值为445/485 nm），用于氯霉素定量检测。该方法无需酶参与，仅需将ThT作为荧光DNA探针加入体系，显著降低了传感器构建与使用成本。双重信号放大步骤同步进行，缩短了检测时间。该方法成功应用于牛奶和鱼肉加标样品中CAP的检测，在60分钟内完成测定，检测限达16 pM（信噪比S/N=3）。