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表面涂层调节真核细胞与原核细胞粘附力的差异——单细胞力显微镜检测结果
摘要： 采用单细胞力显微镜技术，研究了原代小鼠神经元细胞（PNCs）、成骨细胞（MC3T3）和原核细胞（头状葡萄球菌头状亚种）在不同表面接触1至5秒后的最大脱附力（MDF）。带正电的氮化硅表面分别涂覆带正电的聚乙烯亚胺（PEI）或多聚-D-赖氨酸，层粘连蛋白作为第二涂层。PEI诱导的MDF约为5-20纳牛，略高于氮化硅本身。PEI/层粘连蛋白表面的MDF较低（1-5纳牛），其中PDL/层粘连蛋白表面的MDF最低。为排除细胞尺寸等个体特性差异并获得细胞类型特异性MDF，将各细胞在不同涂层上的MDF值相对于最长接触时间下的氮化硅参照值进行归一化处理。除PDL/层粘连蛋白表面显著抑制原核细胞外，原核与真核细胞间的MDF差异总体相当。我们认为层粘连蛋白上较低的MDF源于其空间位阻阻碍了细胞静电粘附至底层聚合物。而PEI能形成从表面结合层向外延伸的长柔性环，可能跨越层粘连蛋白层并与细胞表面及小型原核细胞结合。这体现为氮化硅表面接触两秒后MDF升高，而PEI或PEI/层粘连蛋白表面接触一秒即已达到该数值。我们推测，与真核细胞相比，较小的原核细胞初始粘附更依赖于与PEI环的静电相互作用。
关键词： 原核细胞、聚-D-赖氨酸、氮化硅、层粘连蛋白、细胞黏附、单细胞力谱显微镜、表面涂层、聚乙烯亚胺、真核细胞、最大脱附力
更新于2025-11-21 11:24:58
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LITESEC-T3SS - 利用光控技术实现高时空分辨率的真核细胞蛋白递送系统
摘要： 许多细菌利用III型分泌系统（T3SS）注射体将蛋白质转运至真核宿主细胞。尽管T3SS能高效输出异源货物蛋白，但缺乏靶细胞特异性目前限制了其在生物技术和医疗领域的应用。本研究利用T3SS的动态特性调控其活性：通过光遗传学相互作用开关控制胞质内动态T3SS组分SctQ的可及性，实现光控调节T3SS依赖的效应蛋白分泌。由此开发的LITESEC-T3SS系统（通过内源T3SS组分隔离实现效应蛋白光诱导转位），可在光照下实现T3SS活性的快速、特异且可逆启闭。我们证实该系统能光调控异源报告蛋白的转位，并诱导培养的真核细胞凋亡。LITESEC-T3SS为精准控制蛋白质向真核宿主细胞的分泌与转位提供了新方法，具有前所未有的时空分辨率。
关键词： 蛋白质转运、真核细胞、光遗传学、III型分泌系统、LITESEC-T3SS
更新于2025-09-23 15:21:01
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光学转染
摘要： 将基因导入真核细胞的方法可分为三类：生物化学法转染、物理法转染和病毒介导的转导。"光学转染"作为一种物理转染方法，利用光在哺乳动物细胞质膜上形成短暂微孔的能力。
关键词： 质膜、激光、真核细胞、光转染、基因递送
更新于2025-09-09 09:28:46