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用于检测ATP的开启式与比率型荧光G-四链体适配体传感器方法比较
摘要： 开发了两种荧光适配体传感器方法用于生化系统中ATP的检测。第一种方法采用无标记荧光"开启"策略，利用富含鸟嘌呤的ATP适配体序列与DNA结合剂小檗碱复合物。当存在ATP时，ATP优先与其适配体结合并构象转变为G-四链体结构。小檗碱与G-四链体的结合导致前者荧光信号增强。测得ATP的检测限为3.5 μM。通过荧光、圆二色谱和熔解温度(Tm)实验验证了结合特异性及结构变化。第二种方法基于福斯特共振能量转移(FRET)的比率荧光策略，使用小檗碱作为供体（与淬灭剂金纳米棒(AuNRs)、银纳米颗粒(AgNPs)及荧光团红色量子点(RQDs)、碳点(CDs)分别标记于ATP结合适配体序列的5'和3'末端）来检测ATP。加入ATP和小檗碱后，ATP特异性结合其适配体形成G-四链体，同时小檗碱也结合该结构。这导致小檗碱荧光增强，而RQDs和CDs的荧光通过FRET作用显著猝灭。计算得到的检测限分别为3.6 μM和3.8 μM，表明这些荧光适配体传感器方法可适用于多种小分子检测。
关键词： 适配体传感器、腺苷-5'-三磷酸、金纳米棒、荧光、荧光共振能量转移、小檗碱
更新于2025-09-23 15:22:29
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离子液体基质在基质辅助激光解吸/电离中保留磷酸盐的新策略：以腺苷核苷酸为例
摘要： 腺苷-5'-三磷酸（ATP）在生物系统的代谢活动中发挥着重要作用，为机体提供足够能量。高ATP/AMP比值与糖尿病存在关联，会抑制AMP激活的蛋白激酶（AMPK）活性?；矢ㄖす饨馕缋耄∕ALDI）-质谱（MS）技术在快速测定样品中多种腺苷磷酸盐比例、从而了解代谢过程中的主要能量传递方面具有突出潜力。尽管MALDI被视为MS分析中的软电离技术，但过量的光子能量可能会使磷酸键断裂，导致对ATP水平的误判。本工作采用离子液体基质（ILMs）来减少MALDI过程中的碎片化并提高检测效率。本研究首次证明2,5-二羟基苯甲酸吡啶（DHBP）是进一步定量分析腺苷核苷酸最有效的基质之一。这种对ILMs的系统筛选也加深了对MALDI技术的根本理解。
关键词： 腺苷、离子液体基质、AMPK、三磷酸、软电离、离子液体、ATP、核苷酸、MALDI
更新于2025-09-23 15:19:57