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适用于资源有限环境、利用光学显微镜的简化Dynabeads法计数TCD4+淋巴细胞
摘要： 背景：我们已证实Dynabeads法在资源匮乏地区（ANRS 1226研究）进行CD4+T淋巴细胞计数的可行性。但由于该技术需配备荧光显微镜（此类地区通常不具备），世卫组织鼓励简化该方法以实现光学显微镜下的TCD4+淋巴细胞计数。 方法：采用非荧光染料染色细胞核后通过光学显微镜读取的Dynabeads法（DLM）评估TCD4+淋巴细胞计数。共生成305组三重CD4细胞计数数据，分别来自光镜版Dynabeads法（DLM）、荧光显微镜版Dynabeads法（DFM）及单平台流式细胞术（FCM）。使用FCM检测显示浓度分别为200、400、500和1000个细胞/μl的四份新鲜血样分析DLM准确性，并研究三种方法的相关性。随后评估DLM在200细胞/μl和350细胞/μl阈值下正确划分绝对TCD4+淋巴细胞值的能力。 结果：采用Sternheimer-Malbin、Turck1和Giemsa染色细胞核可实现DLM计数。FCM显示最大标准差和波动幅度，DLM重复性优于FCM。FCM与DFM的相关系数为0.975，与Sternheimer-Malbin、Turck1和Giemsa染色的DLM相关系数分别为0.973、0.972和0.969。DLM在200细胞/μl和350细胞/μl阈值下正确划分TCD4+淋巴细胞值的能力良好。 结论：DLM可获得可靠的TCD4+计数结果。这些发现将有助于资源有限地区进一步降低TCD4+计数成本，使外周实验室乃至面临流式细胞仪试剂维护和短缺问题的中心实验室更广泛地应用该技术。
关键词： Dynabeads法、流式细胞术、资源有限环境、荧光显微镜、光学显微镜、TCD4+淋巴细胞计数
更新于2025-09-11 14:15:04
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基于全息散斑分析和深度学习的无标记运动检测技术在体液中寄生虫检测的应用
摘要： 寄生虫感染是全球重大公共卫生问题。现有基于人工显微镜检查的筛查方法往往难以提供足够的检测通量和灵敏度以实现早期诊断。本研究展示了一种基于运动特征的无标记计算成像平台，通过利用寄生虫的运动特性作为特异性生物标志物和内源性对比机制，快速检测光学密度高的体液中的活动性寄生虫?；诟迷?，我们研发了低成本便携式仪器，可在三维空间中快速筛查约3.2毫升液体样本，通过全息延时散斑图样自动检测并计数活动微生物。我们以导致全球数百万人死亡的多种致病性锥虫（活动性原生动物寄生虫）为检测对象，验证了该平台的性能。结合全息散斑分析算法与深度学习分类技术，在加标全血和人工脑脊液（CSF）样本中实现了无标记高灵敏度锥虫检测：全血检测限达每毫升10个锥虫（比当前最先进寄生虫学方法提升约5倍），脑脊液检测限达每毫升3个锥虫。进一步研究表明，该平台还可检测阴道毛滴虫等其他活动性寄生虫——这种导致滴虫病的病原体影响全球2.75亿人。凭借其低成本、便携化设计及快速筛查能力，该独特平台有望在资源有限地区实现对活动性寄生虫引起的被忽视热带病及其他寄生虫感染的及时灵敏诊断。
关键词： 寄生虫感染、全息散斑分析、锥虫、资源有限环境、深度学习、阴道毛滴虫、无标记成像、基于运动性的检测
更新于2025-09-04 15:30:14