64Cu放射性标记抗人PD-L1纳米抗体Nb6在肺癌小鼠模型中的正电子发射断层成像评估

摘要： 近期，我们筛选出一种新型高亲和力（EC50=0.65 ng/mL）抗人PD-L1特异性骆驼科重链抗体Nb6，用于潜在的hPD-L1靶向非侵入式PET成像研究。本研究将Nb6与双功能螯合剂NCS-Bz-NOTA（2-[(4-异硫氰基苯基)甲基]-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸）偶联，并进一步标记放射性核素64Cu。经PD-10柱纯化后，64Cu-NOTA-Nb6的标记产率超过95%，放射化学纯度超过99%，比活度达14~16 GBq/μmol，在0.01 M PBS和5% HSA溶液中均表现出良好稳定性。通过人肺腺癌A549细胞系测定显示其对hPD-L1的结合亲和力高达3.60 nM。尾静脉注射64Cu-NOTA-Nb6后，Micro-PET设备可在20-38小时清晰观测到肿瘤病灶。研究表明该示踪剂具有优异的病灶检测能力、高肿瘤/非肿瘤信号比，并能特异性靶向A549异种移植瘤模型。综合其良好的稳定性、高亲和力及肿瘤显像特性，64Cu标记的Nb6有望成为诊断hPD-L1过表达肿瘤的理想放射性示踪剂，可用于通过PET分子影像监测PD-L1过表达肿瘤进展并指导靶向治疗。