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新型HER2亲和体与培美曲塞偶联物在肺癌模型中的活体成像表征及抗癌疗效研究
摘要： 引言：本研究合成了一种由HER2特异性亲和体ZHER2:V2与化疗药物培美曲塞组成的新型制剂，旨在开发靶向药物。通过锝-99m放射性标记，在细胞水平和异种移植模型中评估其生物学特性及抗癌效果。 方法：合成ZHER2:V2-培美曲塞偶联物后，利用其C端4个氨基酸（Gly-Gly-Gly-Cys）作为螯合基团进行放射性标记。采用即时薄层色谱法（ITLC）测定[99mTc]Tc-ZHER2:V2-培美曲塞的放射化学产率。分别在体内外考察标记物的稳定性。在HER2阳性A549细胞中开展探针的体外结合亲和力与细胞摄取研究。通过A549细胞和H23细胞（HER2阴性）的体外摄取实验，以及荷A549与H23肿瘤小鼠的体内生物分布和SPECT成像评估肿瘤摄取情况。在细胞和异种移植模型中评价ZHER2:V2-培美曲塞偶联物的抗肿瘤效果。 结果：成功合成ZHER2:V2-培美曲塞并完成锝-99m标记，获得97.0±0.3%的放射化学产率。[99mTc]Tc-ZHER2:V2-培美曲塞在生理盐水和人血清中均保持良好稳定性。该放射性标记物在体外显示出优异的HER2结合特异性与亲和力，并能逐步内化进入细胞。生物分布研究表明A549异种移植瘤呈现显著摄取（注射后4小时每克组织注射剂量百分比2.6±1.0%ID/g），而HER2阴性H23肿瘤摄取极低（注射后4小时0.2±0.1%ID/g，P<0.01）。SPECT成像显示A549异种移植瘤的放射性强度可被过量ZHER2:V2-培美曲塞阻断。ZHER2:V2-培美曲塞治疗显著抑制肿瘤生长（P<0.05），且体重减轻程度低于培美曲塞组。 结论：[99mTc]Tc-ZHER2:V2-培美曲塞具有理想特性和HER2特异性。该偶联物能抑制HER2阳性肺腺癌肿瘤生长，有望成为肺癌靶向治疗药物。 知识进展与临床意义：本化合物通过HER2靶向实现良好抗癌效果，为肿瘤治疗提供了新型靶向策略。
关键词： 培美曲塞、肺癌、放射性核素成像、HER2
更新于2025-09-23 15:21:21
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2016年欧洲显微镜学大会论文集 || 利用纳米颗粒标记和液相电子显微镜研究完整细胞中的膜蛋白
摘要： 细胞质膜上存在受体蛋白，它们如同"倾听者"接收外界的化学信号。这些信号由配体（能与受体特异性结合的小分子）构成。但由于现有分析方法的局限性，这些信号如何被解读并引发细胞决策的过程尚未完全阐明。通常极难直接观察内源性表达的单个蛋白质如何在完整细胞中响应配体结合——这种结合可能触发形成蛋白质复合物进而启动信号传导过程。目前通过生化方法获得的细胞功能知识，大多基于成千上万个细胞的混合材料分析，因而反映的是群体平均水平。但要理解细胞解读信号的基本机制，必须着眼于单个细胞。如今利用液相扫描透射电子显微镜（STEM）[1,2]，已能在完整真核细胞的纳米尺度研究膜蛋白。关键步骤是将目标蛋白与小探针（如金纳米颗?；蛄孔拥愕饶擅卓帕＃┮砸欢砸槐壤匾煨员昙?。将液态细胞置于微流控腔室中（该腔室使样本处于电镜真空环境），即可进行STEM成像。某些研究无需完全封闭细胞，仅需获取细胞表层薄区的信息，此时采用配备STEM探测器[3]的环境扫描电子显微镜（ESEM）即可实现高分辨率成像。液相STEM曾被用于研究完整SKBR3乳腺癌细胞中表皮生长因子HER2在单分子水平的形成过程[4]。作为膜蛋白的HER2对乳腺癌侵袭性和进展具有重要作用，基于单个HER2位置计算配对相关函数的数据分析显示：不同细胞区域间、乃至不同细胞间存在显著的功能差异，这些发现可能为癌症转移和药物反应研究提供重要线索。
关键词： 量子点、扫描透射电子显微镜（STEM）、环境扫描电子显微镜（ESEM）、完整细胞、液相、表皮生长因子受体（EGFR）、人表皮生长因子受体2（HER2）
更新于2025-09-23 15:21:21
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定量分析放射增敏剂金纳米粒子与癌细胞相互作用的数量及定位以优化放射治疗
摘要： 先前研究表明，金纳米粒子（AuNPs）作为有效的放射增敏剂，可在低剂量辐射下优化放疗效果。然而，包括与癌细胞相互作用的金纳米粒子数量及定位在内的增敏机制尚未量化。为探究这些问题，我们制备了通过聚乙二醇（PEG）链连接抗人表皮生长因子受体2（HER2）抗体的金纳米粒子（AuNP-PEG-HER2ab）。该复合物能特异性结合HER2阳性癌细胞，并通过内吞作用进入细胞。体外实验显示，AuNP-PEG-HER2ab的内吞过程不影响其放射增敏效能，而该效能取决于金纳米粒子或X射线的剂量。在荷瘤小鼠体内，AuNP-PEG-HER2ab不仅定位于肿瘤组织周边，也存在于深层肿瘤细胞核附近区域。其在肿瘤组织中的定位分布是实现强效体内放射增敏的关键因素。
关键词： 放射治疗、放射增敏剂、低剂量辐射、金纳米粒子、HER2
更新于2025-09-23 15:19:57
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基于免疫磁珠的生物检测法：利用量子点作为检测标记物，通过伏安分析法检测乳腺癌生物标志物HER2-ECD及肿瘤细胞
摘要： 开发了一种电化学磁免疫传感策略，用于检测人血清中的乳腺癌生物标志物HER2-ECD及乳腺癌细胞。该研究采用羧基功能化磁珠（MBs）构建夹心免疫分析体系，以丝网印刷碳电极（SPCE）作为换能器界面。通过电活性标记物——链霉亲和素修饰的核壳型CdSe@ZnS量子点（QDs）检测亲和过程，并利用差分脉冲阳极溶出伏安法（DPASV）测定量子点释放的Cd2?离子。该方法实现90分钟总检测时长（实际操作约20分钟），HER2-ECD线性范围为0.50-50 ng·mL?1，检测限达0.29 ng·mL?1。优化后的方法还可分析活体乳腺癌细胞，测试了HER2阳性细胞系SK-BR-3、HER2阴性细胞系MDA-MB-231及低HER2表达细胞系MCF-7，证实其对SK-BR-3细胞的选择性。检测信号较HER2阴性细胞（MDA-MB-231）高12.5倍，且检测限低至2 cells·mL?1。
关键词： 乳腺癌、电化学免疫分析、量子点、癌细胞、磁珠、HER2-ECD
更新于2025-09-23 15:19:57
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使用2,3,5,6-四氟苯基6-[<sup>18</sup>F]氟烟酸酯对单域抗体片段进行氟-18标记，实现高肿瘤与肾脏摄取比
摘要： 免疫正电子发射断层扫描（ImmunoPET）试剂正被研究用于评估乳腺癌患者表皮生长因子受体2（HER2）的状态，旨在筛选可能从HER2靶向治疗中获益的患者并监测这些治疗后的进展。我们一直在探索使用单域抗体片段（sdAbs），并通过残留化连接剂用18F标记这些片段以实现这一目的。在本研究中，我们使用2,3,5,6-四氟苯基6-[18F]氟烟酸酯（[18F]TFPFN）标记了两种结合HER2受体不同结构域的sdAbs——2Rs15d和5F7，并在体外和体内评估了它们的HER2靶向特性。[18F]TFPFN-2Rs15d和[18F]TFPFN-5F7合成的总衰变校正放射化学产率分别为5.7±3.6%和4.0±2.0%。标记的sdAbs的放射化学纯度>95%；免疫反应分数约为60%，亲和力处于低纳摩尔范围。[18F]TFPFN-2Rs15d和[18F]TFPFN-5F7在表达HER2的SKOV-3卵巢癌和BT474M1乳腺癌细胞中的细胞内滞留活性与使用先前验证的放射性碘化残留化连接剂N-琥珀酰亚胺基4-胍基甲基-3-[125I]碘苯甲酸酯（[125I]SGMIB）和N-琥珀酰亚胺基3-胍基甲基-5-[125I]碘苯甲酸酯（iso-[125I]SGMIB）标记的sdAbs相似。对于18F和125I标记的5F7，其细胞内活性比2Rs15d高约2倍。虽然[18F]TFPFN-2Rs15d和[18F]TFPFN-5F7的肿瘤摄取与共注射的125I标记的sdAb相当，但18F标记的sdAbs的肾脏摄取显著较低。在微PET图像中，携带SKOV-3和BT474异种移植瘤的无胸腺小鼠的肿瘤清晰可见，除膀胱外，正常组织中的背景活性水平较低。这些结果表明，[18F]TFPFN连接剂可能是开发基于sdAb的免疫PET成像试剂的有价值试剂。
关键词： N-琥珀酰亚胺基4-氟苯甲酸酯（SFB）、2,3,5,6-四氟苯基6-氟烟酸酯（TFPFN）、单域抗体片段、免疫PET、氟-18、HER2
更新于2025-09-11 14:15:04
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功能性成像在HER2阳性乳腺癌中的挑战与机遇
摘要： 乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤，其中20%-30%的病例HER2蛋白过表达，使其成为HER2靶向治疗的适用对象。曲妥珠单抗（赫赛汀?）作为首个HER2靶向治疗药物，是一种人源化单克隆抗体，通过结合HER2细胞外结构域阻断下游信号传导和细胞增殖。该抗体同时具有免疫调节功能，可激发抗体依赖性细胞毒性。研究者已开发出放射性标记曲妥珠单抗作为PET成像剂用于HER2阳性乳腺癌患者，但其临床价值尚未确立。Woo博士及其同事在期刊中报道了采用NOTA螯合剂进行64Cu标记曲妥珠单抗的研究，并声称其药代动力学特性优于64Cu-DOTA标记曲妥珠单抗[1]。但NOTA是否真比DOTA更适合64Cu螯合？他们的结论基于Paudyal等学者（Cancer Sci 2010; 101: 1045-1050）的报道：64Cu-DOTA-曲妥珠单抗在24小时肝脏摄取量为26.9±7.4%ID/g[12]，而64Cu-NOTA-曲妥珠单抗同期肝脏摄取量仅为5.44±1.84%ID/g（图4）[1]。作者认为这种差异源于DOTA螯合物会释放64Cu而NOTA不会。然而两项研究不可直接比较——Paudyal团队使用的是Her2+非小细胞肺癌异种移植模型，Woo团队则采用Her2+乳腺癌异种移植模型。肝脏摄取差异可能仅反映两类肿瘤向肝脏脱落Her2抗原程度的不同。若要论证观点，Woo团队应在相同肿瘤模型中对比DOTA与NOTA标记曲妥珠单抗。这清晰展现了将金属螯合物化学稳定性与不同肿瘤模型中的代谢清除率混为一谈的典型案例。
关键词： PET成像、乳腺癌、HER2、DOTA、曲妥珠单抗、NOTA
更新于2025-09-04 15:30:14