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基于碱性磷酸酶构建用于L-苯丙氨酸灵敏选择性检测的液晶传感平台
摘要： 新生儿苯丙酮尿症的诊断与治疗中，L-苯丙氨酸（L-Phe）的检测已成为最紧迫的问题之一，但目前尚未开发出简单可靠的检测方法。本研究首次报道了新型液晶（LCs）传感平台在灵敏、选择性和无标记检测L-Phe中的应用。我们设计了一种制备单十二烷基磷酸钠（SMP）修饰的暗态液晶传感平台的策略。当碱性磷酸酶（ALP）转移到界面后，由于ALP诱导的SMP裂解，观察到液晶出现暗-亮（D-B）光学图像变化。而当SMP修饰界面与预孵育的ALP和L-Phe接触时，液晶仍保持暗态图像——这种光学现象源于L-Phe对ALP的抑制作用，并通过等温滴定量热法（ITC）进一步验证。该策略用于L-Phe检测时，能从具有相似芳香基团的干扰化合物及其他七种必需氨基酸中实现灵敏选择性区分。更重要的是，在尿液样本中L-Phe的检测限达到1 pg/mL，进一步证明了其实际应用价值。本研究结果明确显示了液晶在L-Phe检测中的优越性，为开发高性能、稳健的临床L-Phe检测探针开辟了道路。
关键词： 传感平台，碱性磷酸酶，表面活性剂，液晶，抑制，L-苯丙氨酸
更新于2025-09-23 15:23:52
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突变型人P-选择素糖蛋白配体-1与肠道病毒71型病毒蛋白1在金纳米等离子体基底上的相互作用及其表面增强拉曼光谱特异性识别
摘要： 蛋白质酪氨酸硫酸化是一种常见的翻译后修饰，能促进细胞间或细胞外蛋白质相互作用，并参与凝血、炎症及病毒感染等多种重要生物学过程。最新研究表明，人P-选择素糖蛋白配体-1（PSGL-1）可作为肠道病毒71型（EV71）的功能性受体。学界推测EV71的衣壳病毒蛋白VP1直接参与了与硫酸化或突变型PSGL-1的特异性结合。通过表面增强拉曼光谱（SERS）技术，在金纳米多孔基底上区分了PSGL-1与VP1的相互作用，并确定了酪氨酸残基位点（46、48和51）的特异性VP1结合位点。SERS检测显示，PSGL-1中的三个酪氨酸位点被苯丙氨酸（F）取代后，在纳米多孔基底突变蛋白的三个区域均获得强苯丙氨酸SERS信号。其中突变位点(51F)和(48F,51F)在1599-1666 cm?1处产生强SERS峰，可能与突变蛋白和纳米多孔基底上抗硫酸酪氨酸的相互作用有关。(48F)、(51F)及(46F,48F)位点的突变蛋白与VP1表现出显著SERS效应，这些位点与VP1的相互作用较弱——表现为突变蛋白中苯丙氨酸信号较强。
关键词： 病毒蛋白1，P-选择素糖蛋白配体-1，表面增强拉曼光谱，纳米多孔，苯丙氨酸
更新于2025-09-23 15:21:01
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基于纳米结构纸平台的LED诱导荧光新生儿苯丙氨酸筛查方法
摘要： 本研究开发了一种新型纸基分析装置（PAD）结合LED诱导荧光（LIF）检测技术（fPAD），用于新生儿样本中苯丙氨酸（Phe）的快速、选择性及灵敏定量分析。将苯丙氨酸脱氢酶（PheDH）和二氢硫辛酰胺脱氢酶固定在预先修饰有壳聚糖包覆氧化锌纳米颗粒（CH-ZnONPs）的纸质微区上。从滤纸采集的血斑样本中提取Phe后，与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）和刃天青混合，滴加至fPAD的反应微区。PheDH催化Phe与NAD+分别转化为苯丙酮酸和NADH，随后NADH被二氢硫辛酰胺脱氢酶氧化并伴随刃天青还原为试卤灵。通过同步视频显微镜以535nm激发波长和580nm发射波长进行LIF检测。通过对比含/不含纳米材料的PAD响应，证实了所开发装置的优异分析性能（两种PAD均修饰相同浓度辣根过氧化物酶HRP）。含纳米材料的PAD荧光信号强度显著高于未修饰PAD。本方法批内和批间变异系数分别低于5.23%和6.67%，检测限达0.125μM。该fPAD实现了新生儿血样中Phe的简便、快速、低成本及高灵敏检测。
关键词： 氧化锌纳米颗粒、苯丙氨酸、纸基分析装置、酶法、荧光检测
更新于2025-09-23 15:19:57
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通过激光烧蚀纳米加工促进目标晶面的生长
摘要： 晶体形貌控制是晶体产品多种应用中不可或缺的环节。然而通过传统调节环境条件（温度、添加剂等）的方法往往难以获得理想晶形。近期我们创新性地开发出一种时空控制蛋白质与氨基酸晶体生长的方法——通过飞秒（fs）激光烧蚀局部改变化晶体结构（如形成螺位错）。本研究为阐明最小损伤条件下控制单晶形貌的适宜激光参数，首先系统考察了脉冲持续时间对L-苯丙氨酸（L-Phe）激光烧蚀及晶体生长的影响。利用可调谐脉冲持续时间（fs至纳秒ns级）的激光系统，发现飞秒激光烧蚀能实现直径小于衍射极限的纳米级精密蚀刻。通过这种飞秒激光纳米加工技术促进目标晶面生长，我们成功制备出传统结晶方法难以获得的L-Phe块状晶体。
关键词： L-苯丙氨酸、纳米加工、单晶生长、晶体形貌控制、飞秒激光烧蚀
更新于2025-09-11 14:15:04
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激光捕获下L-苯丙氨酸三维晶体生长的原位反射成像与显微光谱研究
摘要： 我们利用反射成像和显微光谱技术研究了激光捕获形成的L-苯丙氨酸晶体的生长行为。光学反射显微图像显示，由于入射白光的相长干涉，晶体呈现彩色图像。在激光捕获作用下，晶体表面的颜色分布会动态变化，同时晶体平面面积也会增大。通过测量晶体的反射光谱，我们考察了晶体厚度的时变特性。通过综合分析晶体厚度和晶体平面面积的变化，我们探讨了激光捕获条件下的三维晶体生长机制。
关键词： 反射成像、激光捕获、L-苯丙氨酸、晶体生长、微光谱学
更新于2025-09-11 14:15:04