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基于双搅拌棒辅助双重信号放大的氯霉素无酶荧光检测法
摘要: 介绍了一种无酶荧光检测方法,通过双搅拌棒实现双重信号放大。设计了两条Y型DNA探针并固定在搅拌棒上。当加入目标物(以氯霉素为模型分析物)时,触发目标循环再生并同步催化发夹组装(CHA)。大部分DNA引物从搅拌棒释放至上清液,形成含G-四链体DNA序列的发夹结构。该G-四链体能特异性结合硫黄素T(ThT)并发射荧光(激发/发射峰值为445/485 nm),用于氯霉素定量检测。该方法无需酶参与,仅需将ThT作为荧光DNA探针加入体系,显著降低了传感器构建与使用成本。双重信号放大步骤同步进行,缩短了检测时间。该方法成功应用于牛奶和鱼肉加标样品中CAP的检测,在60分钟内完成测定,检测限达16 pM(信噪比S/N=3)。
关键词: 食品安全,抗生素检测,硫黄素T,催化发夹组装,目标循环
更新于2025-11-19 16:46:39
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基于G-四链体特异性染料的比率型FRET适配体传感器,用于毒素的稳健超快速检测
摘要: G-四链体特异性染料是探测核酸结构的有力工具。在核酸中,适配体备受关注,并被广泛用于构建多功能生物检测体系。本研究基于G-四链体选择性染料硫黄素T(ThT)对适配体本征结构的探测,提出了一种比率型荧光共振能量转移(FRET)适配体传感器,可实现毒素的稳健超快速检测。目标赭曲霉毒素A(OTA)的结合会破坏适配体的G-四链体结构,导致ThT染料从适配体脱离,从而减弱ThT与末端标记染料间的FRET效应,通过FRET信号实现OTA定量。该FRET适配体传感器的信背比相比非FRET型ThT适配体传感器提升了76.9%。值得注意的是,FRET机制消除了因探针浓度差异导致的信号波动,增强了检测稳健性。该适配体传感器对OTA的检测限达0.38 ng/mL,且可在30秒内完成检测。此外,该方法成功应用于咖啡和燕麦样品中OTA的分析,回收率达93.93%-107.59%。因此,基于G-四链体特异性染料探测与FRET方法的设计策略极具应用前景,可推动适配体传感器在食品安全和环境筛查中的实际应用。
关键词: 荧光共振能量转移、G-四链体特异性染料、均相分析、毒素、硫黄素T、适配体
更新于2025-09-23 15:23:52
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一种基于超快分子转子的荧光开启型高铼酸根阴离子水溶液传感器
摘要: 在水性介质中设计用于检测高铼酸根阴离子的传感器极具挑战性,在文献中鲜有报道。本文基于常用超快分子转子染料硫黄素T的聚集诱导发光效应,报道了一种水性介质中高铼酸根阴离子的荧光开启型传感器。通过匹配水亲和力合理解释了其对高铼酸根阴离子的选择性响应:弱水合的高铼酸根阴离子会自发与弱水合的超快分子转子类有机阳离子硫黄素T形成接触离子对,进而产生能提供高铼酸根荧光开启响应的聚集体组装体。当测试环境常见阴离子(如氯离子、硝酸根、硫酸根等)时,发现硫黄素T对高铼酸根阴离子的传感响应具有高度选择性?;雇ü奔浞直娣⑸浜臀露纫览敌圆饬垦芯苛俗宰樽傲蚧扑豑聚集体的形成过程。
关键词: 聚集诱导发光、开启型传感器、荧光传感器、硫黄素T、高铼酸根阴离子
更新于2025-09-10 09:29:36
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结合位点的多态特异性分布决定了α-突触核蛋白纤维中硫黄素T的荧光强度
摘要: 硫黄素T(ThT)是体外半定量追踪淀粉样蛋白形成最常用的荧光染料,能特异性探测纤维状β-折叠含量。近年来研究表明,淀粉样纤维的结构多态性是体内外淀粉样蛋白形成的重要特征。因此,结合淀粉样蛋白结构多态性理解ThT与淀粉样蛋白的相互作用,对正确解读ThT荧光数据至关重要。本研究以两种形态相异但化学组成相同的α-突触核蛋白聚集体为对象,探究了纤维形态对ThT荧光及结合位点的影响。虽然两种聚集体的β-折叠含量相近,但在ThT荧光检测中表现出类型特异性的荧光强度差异。进一步通过纤维结合ThT的荧光寿命测量发现,这些聚集体上至少存在两种性质不同的ThT结合位点。结合位点在纤维表面的相对分布具有形态依赖性,从而决定了观察到的聚集体特异性ThT荧光强度。这些结果揭示了纤维形态在基于ThT的淀粉样蛋白研究中的关键作用,强调了多态性对ThT-淀粉样蛋白相互作用的影响,可解释ThT淀粉样蛋白结合实验中常见的变异性现象。
关键词: 硫黄素T、多态性、淀粉样蛋白、原子力显微镜、α-突触核蛋白
更新于2025-09-04 15:30:14