研究目的
开发一种无需酶的荧光检测方法,用于食品样品中氯霉素的灵敏快速检测,通过目标物循环和催化发夹组装实现双重信号放大,以降低成本并缩短检测时间。
研究成果
该无酶荧光检测法为氯霉素检测提供了一种高灵敏度、快速响应的方法,通过双重信号同步放大技术实现16 pM的极低检测限并显著缩短反应时间。该方法在实际食品样本中展现出良好的特异性、精确度和适用性,较现有方法具有优势。但无法同时检测多种抗生素,表明其在多重检测能力方面仍需进一步改进。
研究不足
该策略无法同时检测多种抗生素,这限制了其在多重分析中的应用。未来的工作旨在开发同步检测方法以及更便携、低成本的策略。
1:实验设计与方法选择:
该检测基于双信号同步放大策略,使用两根修饰DNA探针的搅拌棒。加入氯霉素后,目标物循环与催化发夹组装(CHA)同时发生,导致硫黄素T(ThT)与G-四链体DNA序列结合产生荧光。
2:样本选择与数据来源:
采用加标牛奶和鱼样本评估检测适用性。寡核苷酸由上海生工生物工程技术服务有限公司合成提供。
3:实验设备与材料清单:
设备包括日立H600透射电镜、日立S3400N扫描电镜、岛津MultiNA 202系统及岛津RF-6000荧光分光光度计;材料包含ThT、MPTMS、CAP、多种抗生素、KCl、HAuCl4、TCEP、MCH、PBS及寡核苷酸。
4:TCEP、MCH、PBS及寡核苷酸。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:金搅拌棒经Au纳米颗粒和DNA探针修饰。将修饰棒与H2、H3、ThT及CAP样本在37℃孵育60分钟,随后测定荧光。
5:HThT及CAP样本在37℃孵育60分钟,随后测定荧光。 数据分析方法:
5. 数据分析方法:在485nm处测定荧光强度并绘制标准曲线,根据信噪比计算检测限,通过其他抗生素及常见离子/蛋白质进行特异性与干扰测试。
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