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蓝光可调控的细胞间相互作用为自下而上的组织工程提供了可逆且时空可控的方法
摘要: 控制细胞间相互作用对于理解关键细胞过程以及从单细胞自下而上构建组织至关重要。该挑战在于如何以高时空精度、非侵入性和可持续的方式动态可逆地调控细胞间相互作用。本研究采用光遗传学方法,通过在细胞表面表达蓝光可调控蛋白CRY2或CIBN,利用可见光调控细胞间相互作用。表达CRY2和CIBN的细胞在蓝光照射下形成特异性异源相互作用,实现精确的时空控制。这些相互作用在黑暗环境中可逆,并能反复动态开关。与既往方法不同,这些基因编码蛋白允许长期表达相互作用结构域,且对无毒低强度蓝光响应。此外,此类相互作用适用于将细胞组装成三维多细胞结构。总体而言,该方法捕捉了细胞间相互作用的动态可逆特性,并通过非侵入性方式实现时空维度的可持续调控,为研究细胞间相互作用及以前所未有的灵活性将细胞构件组装成组织提供了新途径。
关键词: 自下而上的组织工程、时空控制、光开关蛋白、细胞粘附、细胞间相互作用
更新于2025-09-23 22:18:15
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细胞接触界面蛋白质-蛋白质相互作用的荧光涨落光谱检测法
摘要: 多种生物过程涉及细胞间相互作用,这类作用通常由相邻细胞界面处的互作蛋白介导。值得注意的是,目前仅有少数检测方法能直接在活细胞中特异性探测此类相互作用。本研究建立了一种测定相邻细胞表面蛋白在细胞接触位点结合能力的方法:首先将目标蛋白分别与不同荧光蛋白融合并共转染细胞,随后通过共聚焦激光扫描显微镜对细胞接触区域的荧光波动进行光谱分析。我们以淀粉样前体蛋白类似物1(APLP1)跨细胞连接区的相互作用为例,验证了该检测方法在生物学相关体系中的可行性。文中详细阐述了基于荧光技术(扫描荧光交叉相关光谱、交叉相关数量与亮度分析)的数据采集方案及仪器校准流程,并讨论了数据分析的关键环节,包括如何识别和校正光漂白或细胞移动等外部干扰导致的异常信号波动。
关键词: 第142期,细胞间黏附,荧光相关光谱,细胞间相互作用,蛋白质-蛋白质相互作用,数量与亮度,荧光涨落光谱,生物化学,N&B
更新于2025-09-09 09:28:46