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用于开发mRNA帽结合蛋白结合活性与水解活性检测的荧光开启探针
摘要： m7G帽是所有真核生物mRNA 5'端独特的核苷酸结构。该帽结构与多种细胞蛋白特异性相互作用，参与对细胞生长和功能至关重要的生物过程。为研究重要帽识别蛋白，我们通过末端磷酸（酯）基团合成了带荧光标记的m7G核苷酸，并探究其结合蛋白或酶切时发射特性的变化。仅芘标记化合物表现出灵敏的"点亮型"探针特性：芘标记的m7GTP类似物与真核翻译起始因子4E（eIF4E）结合时荧光增强达8倍，被脱帽清除酶（DcpS）切割时增强超过30倍。这些发现为开发结合活性及水解活性检测方法奠定了基础。通过已表征的eIF4E配体库和DcpS抑制剂库验证了检测方法的实用性。该DcpS检测法还用于研究HeLa和HEK细胞胞质提取物中内源酶的水解活性及抑制作用。
关键词： eIF4E，荧光测定法，帽结构，芘，DcpS
更新于2025-11-14 15:32:45
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基于等离激元纳米粒子的光学分析在均相溶液及单纳米粒子水平上的最新进展
摘要： 具有特殊局域表面等离子体共振（LSPR）特性的等离子体纳米粒子已广泛应用于多种目标物的光学传感。结合单纳米粒子成像技术，可获取反应和生物过程的动态信息，从而深入理解其原理并设计优异的纳米材料。本综述总结了近期基于等离子体纳米粒子在均相溶液和单纳米粒子水平上对不同分析物的光学检测方法。首先简要介绍LSPR原理，随后列举采用不同传感机制和策略的比色法与荧光法均相检测实例。单等离子体纳米粒子分析从化学反应可视化和生物过程理解两方面进行总结，并介绍这些体系的基本传感机制与性能。最后，本文重点讨论了基于等离子体纳米粒子的光学分析系统面临的挑战与发展趋势。
关键词： 等离子体纳米粒子、单纳米粒子水平、荧光测定法、化学反应、局域表面等离子体共振（LSPR）、光学分析、均相溶液、比色测定法、生物过程
更新于2025-09-23 15:21:01
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海水中H2O2的东莨菪内酯-HRP荧光测定法——关于两阶段方案的呼吁
摘要： 一种单步方案已广泛应用于通过辣根过氧化物酶（HRP）存在下荧光素东莨菪素褪色反应，对天然水样中H2O2进行荧光测定。该方案要求样品中东莨菪素与H2O2的反应、后续内标添加及荧光测量均在荧光仪比色皿的单一pH条件下完成。研究发现该方案易受四种潜在误差影响：过量东莨菪素存在时其与H2O2反应计量比的波动性、pH值对东莨菪素-H2O2反应速率的影响、东莨菪素光漂白效应以及HRP酶失活。这些问题可通过两步法规避——采样后立即在pH7条件下进行H2O2与东莨菪素反应，随后在pH9条件下测定荧光。该方案应为首选。此外，在两步法中，完成H2O2与东莨菪素初始反应后，样品可在室温保存六天或4℃下保存至少一个月再进行荧光测定，此特性可显著降低现场作业的物流难度。
关键词： 过氧化氢、荧光测定法、辣根过氧化物酶、东莨菪素
更新于2025-09-09 09:28:46
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靶标切换三链体纳米镊子与协同荧光团转位实现高选择性三聚氰胺检测
摘要： 本文描述了一种三链体DNA纳米镊子，用于特异性捕获三聚氰胺（MEL）。当MEL通过双面对称氢键与胸腺嘧啶结合到双链中的无碱基位点（AP位点）时，形成三链体的寡核苷酸（TFO）臂可从开放状态切换为闭合状态。在此纳米镊子操作后，结合于AP位点的荧光团会迁移至末端三联体，进而点亮纳米镊子。研究发现TFO臂对允许AP位点结合起关键作用。目标竞争与荧光团迁移的协同过程使该MEL检测方法具有高选择性，甚至能抵抗内源性腺苷和MEL水解产物的干扰。实验采用白屈菜红碱作为荧光探针，在信噪比为3的条件下，估算MEL的检测限约为140 nM。该方法无需分离步骤即可用于加标牛奶样品中MEL的测定?？梢陨柘?，通过利用其他市售DNA修饰来识别其他分析物，该方法为开发基于高选择性三链体的传感器开辟了新途径。
关键词： 牛奶、白杨异黄酮、开关、荧光、氢键、DNA、荧光测定法、无碱基位点
更新于2025-09-04 15:30:14
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水分散性荧光硅纳米点作为探针通过能量转移荧光测定苦味酸
摘要： 以正硅酸四乙酯（TEOS）为硅源、柠檬酸钠为还原剂，采用一锅水热法合成了水分散性荧光硅纳米点（SiNDs）。该方法简便易行。所制得的SiNDs激发/发射峰位于347/440 nm，荧光量子产率达18%，可作为苦味酸（PA）的有效荧光探针。SiNDs与PA结合后蓝色荧光显著猝灭，根据荧光数据计算得出供体-受体间距（R0值）为2.1 nm。建立的荧光检测方法在8 nM至50 μM浓度范围内呈线性响应，检出限低至0.92 nM，响应迅速（2分钟），且对其他硝基芳香化合物和金属离子具有良好的选择性。湖水加标样品的平均回收率为98.4%-100.8%。
关键词： 硝基芳香化合物、苦味酸（PA）、荧光测定法、正硅酸四乙酯（TEOS）、水热策略
更新于2025-09-04 15:30:14