修改AlphaLISA激发波长可提高光合组织样本的检测灵敏度

摘要： 为高通量免疫检测筛选目的，珀金埃尔默公司的AlphaLISA技术相比传统酶联免疫吸附试验（ELISA）具有诸多优势。但其680纳米激发波长与光合色素吸收峰值波长重合，限制了该技术在植物生物技术领域的应用。在含光合基质的检测中，叶绿素受激会产生单线态氧，进而引发与色素相关的背景信号，降低检测灵敏度。本研究测试了一种经定制改造、激发波长避开光系统吸收范围的供体微球，评估其对含光合色素提取物检测灵敏度的改善效果。针对结晶结构域杀虫蛋白靶标的三项检测显示：使用定制供体微球及调整后的激发波长后，色素相关信号被消除，目标阳性与阴性样本的分离度显著提升。阴性光合提取物信号的减弱使定量检测灵敏度提高16倍。该定制供体微球在常规实验室光照下仍保持光稳定性，有望增强AlphaLISA技术的整体实用性。这种定制供体微球为植物生物技术领域提供了便捷、稳定的光合组织高灵敏度高通量免疫检测方案。