源自蛋白A的Z结构域与免疫球蛋白G之间的光控可逆结合

摘要： 通过偶氮苯衍生物的反式与顺式异构体之间的光异构化反应，实现了以可逆且非破坏性的方式调控生物分子功能。本研究将一类可工程化改造以结合多种靶蛋白的小型螺旋状蛋白质——亲和体分子，通过在其分子结构中引入光开关偶氮苯衍生物进行研究。采用固相肽合成法制备了三种不同的Z结构域变体，并通过硫醇定向化学法将其与基于偶氮苯的光开关连接。通过筛选这些蛋白质与IgG-琼脂糖亲和柱的结合能力及光解离特性，发现其中一种Z结构域变体ZC3能高效结合该柱层析介质，并可通过400纳米波长光照实现洗脱。在反向亲和层析实验中，当ZC3变体偶联至琼脂糖基质时，人源IgG1可被捕获至层析柱并通过光照部分洗脱。表面等离子共振(SPR)技术对偶联偶氮苯的ZC3结构域的进一步研究表明其具有高亲和力IgG结合特性，圆二色谱(CD)分析则显示该蛋白质具有高含量的α-螺旋二级结构。