研究目的
研究光开关偶氮苯衍生物在亲和体分子中的应用，以可逆且无损地控制蛋白质-蛋白质相互作用，特别是针对免疫球蛋白G（IgG）。
研究成果
该研究成功地将基于偶氮苯的光开关整合到亲和体支架中，制备出一种光控亲和蛋白。ZC3变体对IgG表现出高效结合能力，并可通过光照洗脱，显示出在亲和层析及其他需要可逆蛋白质-蛋白质相互作用的生物技术应用中的潜力。
研究不足
该系统尚未完全优化，因为部分蛋白质仍滞留在柱中，并在后续酸再生过程中被洗脱，表明轻组分洗脱不完全。光源的位置及琼脂糖介质可能阻碍或削弱了光线到达所有被捕获的蛋白质。
1：实验设计与方法选择：
本研究设计并合成了三种含偶氮苯光开关的Z结构域变体（ZC2、ZC3、ZC4）。方法包括固相肽合成、光开关偶联，以及筛选光控结合与从IgG-琼脂糖亲和柱洗脱的能力。
2：ZCZC4）。方法包括固相肽合成、光开关偶联，以及筛选光控结合与从IgG-琼脂糖亲和柱洗脱的能力。 样本选择与数据来源：
2. 样本选择与数据来源：Z结构域变体基于金黄色葡萄球菌蛋白A的Z结构域NMR结构设计。蛋白质经合成与纯化后用于实验。
3：实验设备与材料清单：
设备包括自动化SPPS系统、HPLC、MALDI-MS、?KTAexplorer系统、Biacore T200系统和JASCO J-810圆二色光谱仪。材料包括IgG-琼脂糖、NHS-琼脂糖及肽合成与偶联所需的各种化学品。
4：实验流程与操作步骤：
流程包括肽合成、纯化、与光开关偶联、光控洗脱筛选、SPR分析及圆二色谱检测。
5：数据分析方法：
数据分析包括MALDI-MS确认分子量、HPLC评估纯度、SPR分析结合动力学及CD分析二级结构。
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