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利用双荧光素酶报告基因实时功能生物成像技术监测神经元分化过程中神经元特异性微小RNA的动态变化
摘要: 监测活细胞中神经元分化过程的能力对于理解神经发育及细胞治疗在神经退行性疾病中的实际应用至关重要。现有研究方法(如Northern印迹和实时PCR分析)虽被广泛用于量化细胞过程中的miRNA表达,但这些方法需破坏细胞且无法提供活体中miRNA表达与功能的动态信息。本研究开发了一种双荧光素酶报告系统,用于监测体外和体内神经元分化过程中神经元特异性miRNA-9和miRNA-124a的表达模式。该miRNA响应型报告载体包含含miRNA靶序列的萤火虫荧光素酶(Fluc)基因(用于信号输出)和海肾荧光素酶(Rluc)基因(用于标准化),两个独立??橛刹煌舳忧?,从而实现精准感知miRNA活性且避免相互转录干扰。我们证实:在P19细胞和裸鼠模型中,神经发生过程中miRNA-9和miRNA-124a的功能激活通过Fluc生物发光信号降低(而Rluc信号不变)得以可视化,表明这两种miRNA能根据其表达特异性下调靶标。本基于双荧光素酶的miRNA成像系统为定量连续监测多种生物学过程中的miRNA活性提供了有效工具。
关键词: miRNAs、双荧光素酶报告基因、神经发生、成像
更新于2025-09-09 09:28:46
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糖尿病视网膜病变中微小RNA表达与炎症标志物信号通路之间的关联
摘要: 糖尿病视网膜病变是糖尿病常见的严重微血管并发症之一,高血糖会对视网膜产生代谢影响。高血糖会引发氧化应激增强,从而刺激炎症通路并导致视网膜血管功能障碍,进而引起毛细血管通透性增加和血管渗漏。糖尿病视网膜病变的主要影响因素之一是炎症信号通路。当代研究发现,微小RNA(miRNAs)可作为早期检测和治疗多种疾病(特别是糖尿病视网膜病变)的功能性生物标志物。miRNAs通过调控靶基因的转录和转录后过程来调节基因表达。因此,miRNAs几乎能调控所有细胞和发育过程,包括先天免疫反应和炎症的调节。本研究旨在探讨miRNAs在炎症通路及糖尿病视网膜病变发病机制中的作用。
关键词: miRNAs、炎症通路、糖尿病视网膜病变
更新于2025-09-09 09:28:46