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荧光膜标记物阐明了伯氏疏螺旋体与蜱细胞系的关联
摘要： 本研究旨在通过流式细胞术、荧光显微镜及共聚焦显微镜，描述伯氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi s.s.）与硬蜱细胞系的关联情况。研究人员用荧光膜标记物（PKH67或PKH26）对螺旋体进行染色后，将其接种至8种不同的蜱细胞系中，并在30°C下孵育24小时。PKH能有效标记伯氏疏螺旋体且不影响其存活率与运动性。在测试的蜱细胞系中，璃眼蜱（Rhipicephalus appendiculatus）细胞系RA243的关联/内化比例最高——无论蜱细胞培养基中BSK-H培养基浓度为高（90%）或低（10%）。经细胞松弛素D处理后，含内化螺旋体的细胞平均比例显著降低；延时摄影显示这些螺旋体在宿主细胞内化过程中会发生剧烈形态变化。几乎所有荧光细菌均位于蜱细胞内部。实验证明PKH标记伯氏疏螺旋体是通过流式细胞术、共聚焦及荧光显微镜分析螺旋体与宿主细胞关联关系的可靠有效工具。
关键词： 荧光膜标记物、蜱细胞系、伯氏疏螺旋体、吞噬作用
更新于2025-11-21 11:24:58
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一种类似斯塔加特病的黄斑营养不良（STGD3）转基因小鼠模型中视网膜色素上皮和光感受器的早期超微结构与功能缺陷
摘要： 目的：我们研究了表达突变型ELOVL4（导致Stargardt样疾病STGD3）的光感受器与视网膜色素上皮（RPE）在视网膜退变初期的相互作用。 方法：通过电子显微镜和视网膜电图（ERG），评估转基因ELOVL4（TG1-2系；TG）及野生型（WT）同窝小鼠的RPE和光感受器超微结构与功能。实验在P30（TG小鼠光感受器丢失前1个月）和P90（约30%视杆细胞丢失时点）进行。为阐明超微结构和功能结果的机制，我们对RPE细胞吞噬外节的关键蛋白进行了Western blotting和免疫组化分析。 结果：首先发现TG小鼠光感受器中内源性ELOVL4蛋白在突变蛋白存在时未发生错误定位。其次，在P30即观察到RPE毒性证据（早于任何光感受器丢失），P90时RPE细胞病理加重。此外，更多吞噬体滞留于RPE细胞顶端侧。视网膜下溶酶体沉积物对吞噬蛋白呈免疫阳性。光感受器（视杆）外节超微结构显示盘膜间距不规则的表面形态破坏。最后，通过ERG a波前沿（P30）和c波（P90）分别检测到视杆细胞和RPE功能障碍迹象。 结论：转基因小鼠光感受器中的人源突变ELOVL4导致早期外节盘膜病理改变和RPE细胞毒性。RPE细胞对这些异常盘膜的缺陷处理，最终可能引发外节截短、光感受器死亡及视力丧失。
关键词： 小鼠，外节段，斯塔加特样黄斑营养不良，光感受器，STGD3，吞噬作用，ELOVL4，视网膜色素上皮细胞
更新于2025-09-23 15:23:52
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一种基于荧光法的增殖检测技术，用于鉴定宿主细胞内复制的细菌
摘要： 理解宿主与病原体的相互作用对于开发新型抗菌药物至关重要。该研究的重要环节在于精准刻画病原体在受感染宿主细胞内的复制过程。本文介绍了一种基于荧光技术的增殖检测方法，可在亚细胞水平识别复制细菌的胞内群体。以金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌代表）和巨噬细胞（宿主吞噬细胞模型）为研究对象，我们证实该方法能可靠鉴定含有复制细菌的单个吞噬细胞。此外，该方法兼容多种细胞探针，可进一步分析复制细菌所处的细胞区室。最后，该方法适用于研究宿主细胞内革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的复制情况。
关键词： 显微镜检查、葡萄球菌、吞噬溶酶体、荧光、吞噬作用、巨噬细胞
更新于2025-09-23 15:22:29
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双视黄醇类物质介导光敏感性，导致缺乏受体酪氨酸激酶Mer的小鼠感光细胞退化。
摘要： 受体酪氨酸激酶Mer由视网膜色素上皮（RPE）细胞表达，参与光感受器外节段的吞噬作用——这一过程可实现膜更新。编码MERTK的基因突变会导致人类致盲性视网膜色素变性。小鼠中靶向破坏Mertk基因会引发RPE介导的外节段吞噬缺陷，导致自体荧光碎片在RPE-光感受器细胞界面沉积，继而引发光感受器细胞退化。本研究表明：在Mertk-/-小鼠中积累的未吞噬外节段碎片内存在光感受器外节段形成的视黄醛加合物（双视黄醇类荧光团）。通过HPLC检测发现，与野生型动物相比，Mertk-/-小鼠的双视黄醇类物质水平升高。在携带异构酶RPE65第450位亮氨酸（Rpe65-Leu450）的白化Mertk-/-小鼠中，其双视黄醇类物质含量也高于携带产生较低双视黄醇水平的甲硫氨酸变异体（Rpe65-450Met）的小鼠。在Mertk功能异常的皇家外科医学院大鼠中，双视黄醇类物质水平高于野生型大鼠。体内眼底自发荧光强度在Mertk-/-小鼠中高于野生型小鼠，且白化Mertk-/-/Rpe65-Leu450小鼠比白化Mertk-/-/Rpe65-450Met小鼠更早达到峰值。值得注意的是，在暴露于更高眼内光照水平（白化鼠vs有色鼠）及携带Rpe65-Leu450的小鼠中，光感受器细胞退化速度更快（相较于Rpe65-450Met小鼠），揭示了双视黄醇类物质积累与光介导的光感受器细胞退化加速之间的关联。结论表明：Mertk缺陷导致的光感受器细胞退化对光的敏感性，与已知的双视黄醇类物质光毒性特征相符。
关键词： Mertk-/-（Mertk基因敲除）、Mertk（Mertk蛋白）、视网膜色素上皮、脂褐素、吞噬作用、视网膜、光降解、双视黄醇类化合物
更新于2025-09-23 15:21:01
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Kif17磷酸化调控感光细胞外节更新
摘要： 背景：KIF17是一种参与纤毛内运输的驱动蛋白-2家族成员，可调控感光细胞外节发育的起始过程。然而其在成熟感光细胞中的功能尚不明确。此外，KIF17的纤毛定位受C端保守序列（KRKK）调控，该序列紧邻一个保守残基（小鼠S1029/斑马鱼S815），既往研究证实该位点可被CaMKII磷酸化。但这种磷酸化能否调控KIF17在纤毛感光细胞中的定位及功能仍属未知。 结果：通过斑马鱼感光细胞的转基因表达实验，我们发现模拟磷酸化的KIF17在外节锥细胞层定位增强。值得注意的是，模拟磷酸化KIF17的表达会显著增强感光细胞外节通过盘状脱落进行的更新（以细胞自主方式实现），而斑马鱼和小鼠的kif17基因突变体则表现出盘状脱落减少。最后，锥细胞中持续激活的tCaMKII表达会导致依赖KIF17的盘状脱落增加。 结论：综合数据支持以下模型——KIF17的磷酸化促进其在外节锥细胞层的定位及盘状脱落过程，该过程对感光细胞的维持与稳态至关重要。尽管盘状脱落研究多聚焦于视网膜色素上皮细胞对外节吞噬机制，本工作揭示了感光细胞源性信号在盘状脱落机制中的重要作用。
关键词： 视盘脱落、视网膜、吞噬作用、光感受器、纤毛、轴丝内运输、驱动蛋白
更新于2025-09-23 15:21:01
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不同组成量子点在中性粒细胞与淋巴细胞中固定作用的差异
摘要： 流式细胞术、扫描电子显微镜和X射线微分析研究表明，量子点在淋巴细胞和中性粒细胞中的固定/内化过程存在差异。量子点在淋巴细胞表面呈点状固定，而中性粒细胞则通过吞噬作用使量子点聚集体聚集于核周区域。量子点表面的复杂功能基团会显著抑制血细胞对其的固定/内化过程。
关键词： 淋巴细胞、中性粒细胞、内化作用、量子点、吞噬作用
更新于2025-09-11 14:15:04
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在小鼠视网膜退行性疾病模型中，穆勒胶质细胞会吞噬死亡的感光细胞。
摘要： 色素性视网膜炎是一种毁灭性的致盲疾病，全球每4000人中就有1人受其影响。在该病症发展过程中，吞噬清除死亡感光细胞体具有?；ぷ饔谩ü乐瓜赴槠鸦斐啥钔馐油に鹕?。但执行清除功能的细胞身份始终未明。我们利用色素性视网膜炎小鼠模型（RhoP23H/P23H），阐明了Müller胶质细胞对视杆细胞吞噬作用的机制：在视网膜退化早期，Müller胶质细胞会参与外核层全层濒死/死亡视杆细胞的吞噬，约50%的Müller细胞参与此过程，且其中超过90%的Müller吞噬体成熟为吞噬溶酶体。这些发现表明Müller胶质细胞是主要吞噬执行者。相比之下，巨噬细胞仅在感光细胞退化期间迁移至外核层内侧，仅参与有限数量濒死/死亡感光细胞的吞噬。健康野生型小鼠的视网膜中，Müller胶质细胞虽频率较低但仍会吞噬死亡视杆细胞体。综上，Müller胶质细胞的吞噬功能对正常及病理状态下的视网膜稳态维持与结构重组具有重要作用。
关键词： 色素性视网膜炎、吞噬作用、视杆细胞、视紫红质
更新于2025-09-10 09:29:36
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基于成像流式细胞术和共聚焦显微镜的F-肌动蛋白与磷脂酰肌醇动态在白细胞免疫型受体介导吞噬事件中的研究
摘要： 先天免疫系统的细胞通过表面表达的免疫调节受体快速检测并清除入侵微生物，这些受体能将胞外结合事件转化为有效的效应反应。斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus）白细胞免疫型受体（IpLITRs）是一类免疫调节蛋白家族，已被证实可调控多种先天免疫细胞效应反应（包括吞噬过程）。这些受体调控吞噬作用的机制尚未完全阐明，但我们先前研究发现不同类型的IpLITR通过依赖ITAM和不依赖ITAM的途径控制靶细胞吞噬。本研究主要目标是开发并运用基于成像流式细胞术和共聚焦显微镜的检测方法，进一步探究不同IpLITR介导的吞噬途径中F-肌动蛋白与磷脂酰肌醇的动态变化。结果显示：依赖ITAM的IpLITR诱导吞噬反应会引发F-肌动蛋白聚合及PI(4,5)P2重分布的经典改变；而不依赖ITAM的IpLITR吞噬反应则产生独特的F-肌动蛋白与PI(4,5)P2重分布模式，这可能与其调控替代信号通路的能力有关。此外，两种IpLITR诱导的吞噬途径均使靶细胞内化至富含PI(3)P的吞噬体中，表明该吞噬体区室处于成熟阶段。总体而言，这个基于成像的平台可用于监测IpLITR介导吞噬过程中信号分子的募集与分布，或将成为研究鱼类其他免疫调节受体类型功能的有效策略。
关键词： 细胞骨架动力学、硬骨鱼、磷脂酰肌醇、白细胞免疫型受体、成像技术、吞噬作用、先天免疫、荧光探针、F-肌动蛋白、流式细胞术
更新于2025-09-04 15:30:14