研究目的
研究单个染料分子与单个等离子体纳米颗粒耦合时的光谱重塑现象,以理解光-物质相互作用及局部环境对荧光发射的影响。
研究成果
单分子高光谱成像显示,发射光谱比局域表面等离子体共振(LSPR)更蓝的染料会出现发射光谱红移,而发射光谱比LSPR更红的染料则会出现蓝移。光谱重塑的程度与电磁模拟结果一致,这证明了单分子高光谱成像在研究光-物质相互作用方面的强大能力。
研究不足
该研究未对因与纳米颗粒耦合导致的分子错位进行校正,这会影响分子的表观位置。实验结果与模拟之间的差异也可能归因于颗粒的异质性。
1:实验设计与方法选择:
采用单分子超光谱超分辨荧光成像技术测量金纳米颗粒(AuNPs)附近荧光团的发射光谱和超分辨定位。
2:样本选择与数据来源:
使用修饰有AuNPs的玻璃盖玻片及四种与AuNPs散射光谱具有不同光谱重叠的荧光染料(BDP-FL、BDP-R6G、Cy3、Cy3.5)。
3:6G、CyCy5)。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:倒置显微镜(Olympus IX-71)、1.4数值孔径100×油浸物镜(Olympus UPLSAPO 100XO)、488纳米激光器(Coherent Sapphire)、EMCCD相机(Andor iXon 897、Andor iXon 887)、光谱仪(Princeton Instruments SP-2300i)。
4:1)、4数值孔径100×油浸物镜(Olympus UPLSAPO 100XO)、488纳米激光器(Coherent Sapphire)、EMCCD相机(Andor iXon Andor iXon 887)、光谱仪(Princeton Instruments SP-2300i)。 实验步骤与操作流程:
4. 实验步骤与操作流程:将染料溶液滴加至基底,在染料分子随机吸附至盖玻片时获取单分子图像和光谱。
5:数据分析方法:
采用SMALL-LABS方法进行背景扣除,通过双高斯拟合实现超定位与光谱解卷积。
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Olympus UPLSAPO 100XO
UPLSAPO 100XO
Olympus
1.4 NA 100× oil-immersion objective used for microscopy.
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Coherent Sapphire
Sapphire
Coherent
488-nm laser used for excitation of fluorescent dyes.
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Andor iXon 897
iXon 897
Andor
EMCCD camera used for spectral imaging.
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Andor iXon 887
iXon 887
Andor
EMCCD camera used for imaging.
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Olympus IX-71
IX-71
Olympus
Inverted microscope used for single-molecule epifluorescence microscopy.
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Princeton Instruments SP-2300i
SP-2300i
Princeton Instruments
Spectrometer used for dispersing light for spectral imaging.
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