研究目的
开发一种等离子体液滴屏幕方法,用于单细胞分泌物的单步免洗涤多重检测。
研究成果
等离子体液滴免疫分析法是单细胞分泌分析的有力工具,拓展了单细胞功能分析的应用范围。随着该技术的不断完善,等离子体液滴筛选平台在合成生物学、疾病诊断与治疗支持等领域有望获得更广泛的应用。
研究不足
细胞筛选的通量受限于记录细胞示踪剂荧光所需的积分时间。通过增强目标分子结合时的折射率变化可提高灵敏度。由于营养有限,滴液系统中无法妥善处理长期(超过3天)的细胞培养。
1:实验设计与方法选择:
开发了一种等离子体液滴筛选方法,用于单细胞分泌物的单步无洗涤多重检测。将单个细胞与抗体偶联的金纳米棒(AuNRs)封装在液滴中以评估其分泌水平。等离子体共振峰的偏移反映了分泌蛋白的量,无需额外的指示剂和洗涤步骤。
2:样本选择与数据来源:
使用了人乳腺癌细胞系(MDA-MB-231)和人早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)的细胞。
3:实验设备与材料清单:
金纳米棒(AuNRs)、暗场光谱仪、PDMS微流控芯片、激光驱动氙灯、倒置暗场显微镜、光谱仪、光谱CCD相机。
4:实验步骤与操作流程:
将细胞与AuNRs封装在液滴中,孵育后通过暗场光谱仪进行筛选。
5:数据分析方法:
通过分析等离子体共振峰的偏移来量化目标生物分子与AuNR表面的结合。
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laser-driven xenon light
EQ-99X LDLS
Energetiq Technology
Used for illumination in dark-field spectroscopy.
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spectrometer
Shamrock 303i
ANDOR Technology Ltd
Used to disperse scattered light into a spectrum.
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spectroscopic CCD camera
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Andor Technology Ltd
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gold nanorods
AuNRs
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dark-field spectroscope
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PDMS microfluidics
Used for droplet encapsulation.
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inverted dark-field microscope
Eclipse Ti–U
Nikon
Used to collect scattered light from AuNRs.
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